1.一种酰基转移酶,其特征在于,所述酰基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种权利要求1所述酰基转移酶在制备乙酰哈巴苷中的应用,其特征在于,所述应用为:以表达酰基转移酶的重组基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体或湿菌体超声破碎提取的纯酶为催化剂,以哈巴苷为底物,以乙酸乙酯为酰基供体,以pH7‑10的缓冲液为反应介质构成转化体系,在25‑60°C、800‑1500 rpm条件下进行催化反应,反应液分离纯化,获得乙酰哈巴苷。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,所述转化体系中底物哈巴苷加入浓度为10‑
100 mM,乙酸乙酯的加入浓度为50‑150 mM,湿菌体的加入浓度为0.1‑20 g/L。
4.一种权利要求1所述酰基转移酶的突变体,其特征在于,所述酰基转移酶突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列突变为下列之一:(1)第78位丝氨酸突变为缬氨酸,S78V;(2)第124位丝氨酸突变为异亮氨酸,S124I;(3)第216位丙氨酸突变为苯丙氨酸,A216F;(4)第
170位赖氨酸突变为亮氨酸,K170L;(5)第255位天冬氨酸突变为蛋氨酸,D255M;(6)上述(1)‑(3)组合突变,S78V/S124I/A216F;(7)上述(1)‑(4)组合突变,S78V/S124I/A216F/K170L;(8)上述(1)‑(5)组合突变,S78V/S124I/A216F/K170L/D255M。
5.一种表达权利要求4所述酰基转移酶突变体的重组基因工程菌。
6.一种权利要求4所述酰基转移酶突变体在制备乙酰哈巴苷中的应用。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,所述应用为:以表达酰基转移酶突变体的重组基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体或湿菌体超声破碎提取的纯酶为催化剂,以哈巴苷为底物,以乙酸乙酯为酰基供体,以pH7‑10的缓冲液为反应介质构成催化体系,在25‑60°C、
800‑1500 rpm条件下进行催化反应,反应液分离纯化,获得乙酰哈巴苷。
8.如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述催化体系中底物哈巴苷加入浓度为10‑
100 mM,乙酸乙酯的加入浓度为50‑150 mM,湿菌体的加入浓度为0.1‑20 g/L。
9.如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述湿菌体按如下方法制备:
将表达酰基转移酶或突变体的重组基因工程菌接种至含终浓度50 μg/mL卡那霉素LB固体平板上,37°C培养12~18 h后,挑取单菌落接种于含终浓度50 μg/mL卡那霉素的LB液体培养基中,37℃、180rpm培养8 h,获得种子液;将种子液以体积浓度2%的接种量接种于含终浓度50 μg/mL卡那霉素的LB液体培养基中,37°C、180 rpm培养2 h后,添加终浓度0.1 mM的IPTG,16°C、180 rpm诱导12‑18 h,所得菌液在超低温高速离心机中8000 rpm、4°C条件下离心10 min,收集湿菌体。