1.一种暗纹东方鲀肠上皮细胞分离培养及应激模型建立的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、将暗纹东方鲀幼鱼在盐水中养殖7‑10d，期间投喂含新霉素和氨苄青霉素饲料，幼鱼取样前禁食；

步骤2、幼鱼取样麻醉后无菌解剖摘取中段肠道，置于自配的清洗液中，去除肠系膜，纵向剪开肠道，刮去内容物，用自配的清洗液清洗2‑3遍，放入无菌离心管中剪成体积为0.5～3

0.8mm肠组织块，自配清洗液的配方如下：

上述清洗液经微孔滤膜过滤除菌，即得；

步骤3、向肠组织块中加入0.5～1ml胶原酶Ⅳ消化液，金属浴消化，每隔5～10min取出吹打一次，加入提前配好28℃预温过的完全培养基终止消化，100目筛网过滤后于1000rpm，低温离心后向沉淀中加适量完全培养基，用移液枪反复轻轻吹打混匀，补足完全培养基后进行培养，完全培养基成分为DMEM+胎牛血清+暗纹东方鲀血清，三者比例关系为15～16：2～4：1～2，每100ml培养液中加入400‑500μl双抗溶液，双抗溶液包括青霉素100Units/ml、链霉素100μg/ml；

步骤4、培养后吸除培养基，添加含皮质醇的完全培养基刺激肠上皮细胞24h建立氧化应激模型，所述皮质醇浓度为80～120nmol/L。

2.根据权利要求1所述的暗纹东方鲀肠上皮细胞分离培养及应激模型建立的方法，其特征在于，步骤1中，所述暗纹东方鲀幼鱼，体长为5±0.5cm。

3.根据权利要求1所述的暗纹东方鲀肠上皮细胞分离培养及应激模型建立的方法，其特征在于，步骤1中，期间投喂的饲料中含新霉素和氨苄青霉素浓度为10～20U/kg和15～

20U/kg，两者比例关系为2～4：3～4。

4.根据权利要求1所述的暗纹东方鲀肠上皮细胞分离培养及应激模型建立的方法，其特征在于，步骤1中，所述盐水浓度为8‑10ppt，禁食时间为24‑28h。

5.根据权利要求1所述的暗纹东方鲀肠上皮细胞分离培养及应激模型建立的方法，其特征在于，步骤3中，所述胶原酶Ⅳ消化液质量浓度为0.25～0.3％；消化条件为28℃金属浴消化25～30min。

6.根据权利要求1所述的暗纹东方鲀肠上皮细胞分离培养及应激模型建立的方法，其特征在于，步骤3中，所述低温离心为4℃离心5‑6min。

7.根据权利要求1所述的暗纹东方鲀肠上皮细胞分离培养及应激模型建立的方法，其特征在于，步骤3中，所述培养为28‑30℃、4‑6％CO2，进行培养72h。

8.根据权利要求1所述的暗纹东方鲀肠上皮细胞分离培养及应激模型建立的方法，其特征在于，步骤4中，所述肠上皮细胞存活率为90％以上。