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专利号: 2020107814788
申请人: 南京师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-08-18
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种特异性引物鉴别暗纹东方鲀、红鳍东方鲀及杂交东方鲀的方法,其特征在于,包括提取待鉴定的东方鲀基因组DNA、利用特异性引物对东方鲀DNA进行PCR扩增以及PCR产物检测;

所述PCR扩增反应体系为灭菌水7.4μL,2×Taq Plus Mix 10μL,10uM正反特异性引物各0.8μL,DNA1μL;

所述PCR扩增反应程序为95℃预变性5min;40个循环:94℃变性30sec,58℃退火30sec,

72℃延伸30sec;最后72℃延伸7min,4℃保存;

PCR产物检测为琼脂糖凝胶电泳检测扩增条带,其中暗纹东方鲀有3条条带,位置分别在150bp、800bp和1500bp左右;红鳍东方鲀有3条条带,位置分别在150bp、1000bp和1800bp左右;杂交东方鲀有5条条带,位置分别处于150bp、800bp、1000bp、1500bp和1800bp左右;

所述用于鉴别暗纹东方鲀、红鳍东方鲀及杂交东方鲀的特异性引物,包括正向引物和反向引物,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑2所示:正向引物SEQ ID NO.1:5′‑AAAGGGGAGTTTTTCCTTGCCACT‑3′;

反向引物SEQ ID NO.2:5′‑CCCACATTCTCTCCATCTCCTCCT‑3′。