1.一种式(I)所示的小分子探针,
2.一种权利要求1所述小分子探针的制备方法,其特征在于所述方法按如下步骤进行:(1)将式(1‑2)所示化合物溶于无水N,N‑二甲基甲酰胺中,加入碳酸钾,逐滴加入对硝基溴化苄,室温下搅拌反应4小时后,用乙酸乙酯萃取,有机相水洗,饱和水盐水洗涤,用无水Na2SO4干燥,过滤,滤液旋蒸除去有机溶剂后,浓缩物通过硅胶薄层层析色谱法纯化,以体积比1:1的乙酸乙酯/石油醚为展开剂,收集Rf值为0.2‑0.3的组分,得到式(1‑3)所示化合物;
(2)将步骤(1)制备的式(1‑3)所示化合物溶于无水二氯甲烷中,加入二乙胺基三氟化硫,0~25℃反应2‑10小时后,用乙酸乙酯萃取,有机相水洗,饱和盐水洗涤,用无水Na2SO4干燥,过滤,滤液旋蒸除去有机溶剂后,浓缩物通过硅胶薄层层析色谱法纯化,以体积比1:4的乙酸乙酯/石油醚为展开剂,收集Rf值为0.2‑0.4的组分,得到式(I)所示小分子探针;
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于步骤(1)中无水N,N‑二甲基甲酰胺体积用量以式(1‑2)所示化合物物质的量计为10~30mL/mmol;式(1‑2)所示化合物与碳酸钾物质的量之比为1:1~5;式(1‑2)所示化合物与对硝基溴化苄的投料物质的量之比为1:0.5‑2。
4.如权利要求2所述的方法,其特征在于步骤(2)中无水二氯甲烷体积用量以式(1‑3)所示化合物物质的量计为5~8mL/mmol;式(1‑3)所示化合物与二乙胺基三氟化硫的投料物质的量之比为1:1‑5。
5.如权利要求2所述的方法,其特征在于步骤(2)所述反应在0℃冰浴下反应30分钟后,再在室温下反应3‑4小时。
6.如权利要求2所述的方法,其特征在于步骤(1)式(1‑2)所示化合物按如下步骤制备:将式(1‑1)所示4‑羟基扁桃酸溶于无水N,N‑二甲基甲酰胺中,缓慢加入炔丙胺,加入1‑羟基苯并三唑,冰浴搅拌,再加入1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐和N,N‑二异丙基乙胺,氮气保护下,冰浴反应15分钟后转室温反应16小时,反应液用乙酸乙酯萃取,收集有机相用水洗,饱和食盐水洗,有机相用无水Na2SO4干燥,过滤,滤液旋蒸除去有机溶剂,浓缩物通过硅胶薄层色谱法纯化,以体积比8:1的二氯甲烷/甲醇为展开剂,收集Rf为0.3~0.4之间的组分,得到式(1‑2)所示化合物;
7.如权利要求6所述的方法,其特征在于无水N,N‑二甲基甲酰胺体积用量以式(1‑1)所示化合物物质的量计为1‑2mL/mmol;式(1‑1)所示化合物与炔丙胺物质的量之比为1:0.5‑
2;式(1‑1)所示化合物与1‑羟基苯并三唑物质的量之比为1:0.001‑0.1;式(1‑1)所示化合物与1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐物质的量之比为1:1‑2;式(1‑1)所示化合物与N,N‑二异丙基乙胺的投料物质的量之比为1:1‑2。
8.一种权利要求1所述式(I)所示小分子探针在制备硝基还原酶检测剂中的应用。
9.如权利要求8所述的应用,其特征在于所述所述硝基还原酶由大肠杆菌表达。