1.一种醛酮还原酶突变体,其特征在于所述醛酮还原酶突变体为下列之一:(1)将SEQ ID No.2所示氨基酸第125位异亮氨酸突变为缬氨酸;(2)将SEQ ID No.2所示氨基酸第125位异亮氨酸突变为缬氨酸,同时第30位丝氨酸突变为丙氨酸、组氨酸或脯氨酸;(3)将SEQ ID No.2所示氨基酸第125位异亮氨酸突变为缬氨酸,且第212位谷氨酰胺突变为精氨酸或天冬酰胺;(4)将SEQ ID No.2所示氨基酸第125位异亮氨酸突变为缬氨酸,同时第30位丝氨酸突变为脯氨酸,且第212位谷氨酰胺突变为精氨酸或天冬酰胺;(5)将SEQ ID No.2所示氨基酸第125位异亮氨酸突变为缬氨酸,同时第30位丝氨酸突变为丙氨酸,且第212位谷氨酰胺突变为精氨酸;(6)将SEQ ID No.2所示氨基酸第125位异亮氨酸突变为缬氨酸,同时第30位丝氨酸突变为脯氨酸,且第212位谷氨酰胺突变为精氨酸,第63位异亮氨酸突变为色氨酸。
2.如权利要求1所述醛酮还原酶突变体,其特征在于所述醛酮还原酶突变体是将SEQ ID No.2所示氨基酸第125位异亮氨酸突变为缬氨酸,同时第30位丝氨酸突变为脯氨酸,且第212位谷氨酰胺突变为精氨酸,第63位异亮氨酸突变为色氨酸。
3.一种权利要求1所述醛酮还原酶突变体在不对称还原6‑氰基‑(5R)‑羟基‑3‑羰基己酸叔丁酯制备6‑氰基‑(3R,5R)‑二羟基己酸叔丁酯中的应用。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述的应用方法为:将含醛酮还原酶突变体基因的重组基因工程菌经诱导培养获得的湿菌体和含葡萄糖脱氢酶基因的工程菌经诱导培养获得的湿菌体混合后用pH 7.5、100mM的磷酸盐缓冲液重悬后超声破碎,取破碎混合液为催化剂,以6‑氰基‑(5R)‑羟基‑3‑羰基己酸叔丁酯为底物,以葡萄糖为辅底物构成反应体系,在30℃、150‑300转/分钟条件下进行反应,反应结束,反应液分离纯化,获得6‑氰基‑(3R,5R)‑二羟基己酸叔丁酯;所述葡萄糖脱氢酶基因核苷酸序列为SEQ ID No.3所示。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述反应体系中,6‑氰基‑(5R)‑羟基‑3‑羰基己酸叔丁酯终浓度50~100g/L,葡萄糖终浓度75~150g/L,催化剂用量以破碎前湿菌体总量计为50‑100g/L,含醛酮还原酶突变体基因的重组基因工程菌经诱导培养获得的湿菌体和含葡萄糖脱氢酶基因的工程菌经诱导培养获得的湿菌体以质量比3:1混合。
6.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述湿菌体按如下方法制备:将含醛酮还原酶突变体基因的重组基因工程菌接种到含终浓度50μg/mL卡那霉素的LB液体培养基中,37℃培养9小时,以体积浓度2%的接种量接种到新鲜的含终浓度50μg/mL卡那霉素的LB液体培养基中,37℃、180转/分钟培养1.5小时,再向培养液中加入终浓度为0.1mM IPTG,28℃培养
10小时后,4℃、8000转/分钟离心10分钟,获得含醛酮还原酶突变体的湿菌体;所述含葡萄糖脱氢酶基因的工程菌经诱导培养获得的湿菌体制备方法同含醛酮还原酶突变体基因的湿菌体。
7.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述超声破碎条件为:将含醛酮还原酶突变体基因的重组基因工程菌经诱导培养获得的湿菌体和含葡萄糖脱氢酶基因的工程菌经诱导培养获得的湿菌体混合后用pH 7.5、100mM磷酸盐缓冲液重悬,在冰水混合物上超声破碎10分钟,超声破碎条件:功率为400W,破碎1秒、暂停1秒。