利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2020115907093
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-03-02
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一株分泌霜霉威单克隆抗体的杂交瘤细胞株ABC07,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,简称CGMCC,保藏编号CGMCC No.19180,保藏日期2019年11月

28日,分类命名单克隆细胞株。

2.霜霉威单克隆抗体,其特征在于:其是由保藏编号CGMCC No.19180的杂交瘤细胞株ABC07分泌产生。

3.霜霉威半抗原的制备方法,其特征在于步骤如下:将化合物1:4‑(2‑溴乙基)苯甲酸,N,N‑二甲基‑1,3‑二氨基丙烷和K2CO3在DMF中的混合物搅拌过夜,将反应混合物冷却至室温;浓缩混合物,得到粗产物化合物2,为白色固体;

将化合物2 和TEA在DMF中的溶液中加入碳酰氯丙基酯;将反应混合物在室温搅拌过夜,将混合物浓缩,得到粗产物,将其通过制备型HPLC纯化两次,得到黄色油状物霜霉威衍生物,即为霜霉威半抗原。

4.根据权利要求3所述霜霉威半抗原的制备方法,其特征在于步骤如下:将化合物1:4‑(2‑溴乙基)苯甲酸2.0g、8.73mmol,N,N‑二甲基‑1,3‑二氨基丙烷8.90g、

87.3mmol和K2CO3 2.42g、17.5mmol在40mL DMF中的混合物在50℃下搅拌过夜,将反应混合物冷却至室温;浓缩混合物,得到粗产物化合物2,为白色固体;

在0℃下,将化合物2 10.0g、8.73mmol和TEA 13.2g、131mmol在200mL DMF中的溶液中加入碳酰氯丙基酯21.5g、175mmol;将反应混合物在室温搅拌过夜;将混合物浓缩,得到粗产物,将其通过制备型HPLC纯化两次,得到黄色油状物霜霉威衍生物,即为霜霉威半抗原。

5.霜霉威免疫原的制备方法,其特征在于:取霜霉威半抗原,再加入1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐EDC和N‑羟基琥珀酰亚胺NHS,使用N,N‑二甲基甲酰胺DMF溶解,室温搅拌,活化;另取牛血清蛋白BSA溶解于碳酸盐缓冲溶液CBS中;将上述活化液逐滴加入BSA溶液中,室温搅拌反应过夜后,取出免疫原PBS透析,分装保存。

6.根据权利要求5所述霜霉威免疫原的制备方法,其特征在于步骤如下:取4.5mg上述霜霉威半抗原,再加入5.0 mg 1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐EDC和3.7mg N‑羟基琥珀酰亚胺NHS,使用N,N‑二甲基甲酰胺DMF溶解,室温搅拌,活化6h;另取15mg牛血清蛋白BSA溶解于3mL、0.05M、pH9.6的碳酸盐缓冲溶液CBS中;将上述活化液逐滴加入BSA溶液中,室温搅拌反应过夜后,取出免疫原PBS透析3天,‑20℃分装保存。

7.霜霉威包被原的制备方法,其特征在于:取霜霉威半抗原,再加入1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐EDC和N‑羟基琥珀酰亚胺NHS,使用N,N‑二甲基甲酰胺DMF溶解,室温搅拌活化;另取OVA溶解于碳酸盐缓冲溶液溶液CBS中;将上述活化液逐滴加入OVA溶液中,室温搅拌反应过夜后,取出免疫原PBS透析,分装保存。

8.根据权利要求7所述霜霉威包被原的制备方法,其特征在于步骤为:取3mg上述霜霉威半抗原,再加入5.0 mg EDC和3.7mg NHS,使用DMF溶解,室温搅拌,活化6h;另取10mg OVA溶解于3mL、0.05M、pH9.6的CBS溶液中;将上述活化液逐滴加入OVA溶液中,室温搅拌反应过夜后,取出免疫原PBS透析3天,‑20℃分装保存。

9.权利要求2所述霜霉威单克隆抗体的应用,其特征在于:用于食品中霜霉威残留的检测。