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专利号: 2018113952538
申请人: 黄宝兵
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-05-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种盐霉素抗原的制备方法,其特征在于,为将盐霉素半抗原与载体蛋白偶联得到;

所述盐霉素半抗原的分子式为:

所述盐霉素半抗原的制备方法,包括以下步骤:

1)取盐霉素0.75g,加乙醇50ml溶解,取水合肼0.13g,加1ml水溶解,混入到乙醇溶液中,60℃搅拌4h,停止反应,旋蒸,除去乙醇,加水50ml,乙酸乙酯50ml×3,萃取三次,合并有机相,无水硫酸钠干燥,蒸干,二氯甲烷与正己烷的体积比为1:4,80ml重结晶,得到肼基化盐霉素0.7g,收率92%;

2)取肼基化盐霉素0.7g,加乙腈60ml溶解,加KOH 0.53g,加无水碘化钠0.22g,充分搅拌后,加4‑溴丁醛0.37g,70℃加热搅拌反应10h;停止反应,旋蒸除去乙腈,加水80ml,加乙酸乙酯120ml萃取,有机相无水硫酸镁干燥,蒸干,上硅胶柱,石油醚与乙酸乙酯的体积比为

3:1,洗脱分离,得到丁醛‑盐霉素产物0.69g,收率90.78%;

所述载体蛋白为牛血清白蛋白;

所述盐霉素半抗原与载体蛋白偶联方法为:取丁醛‑盐霉素半抗原产物62mg,加乙醇

2ml溶解,澄清,得到A液;取牛血清白蛋白100mg,加0.02mol/L 7ml碳酸钾溶液溶解,得到B液,在搅拌下,将A液缓慢滴加到B液中,4℃搅拌24h,加6mg硼氢化钠,恢复到室温,继续搅拌

3h;0.02mol/L PB缓冲液透析纯化三天,每天换液3次,得到盐霉素‑BSA偶联物,即为盐霉素抗原。