1.一种用于检测卡那霉素的电化学发光适配体传感器,其特征在于,所述电化学发光适配体传感器由适配体负载于复合材料Au@HKUST‑1/PTC‑Cys修饰玻碳电极的表面制备而成;
电化学发光适配体传感器的制备方法,其特征在于,所述方法通过Au‑S键结合作用将适配体负载在Au@HKUST‑1/PTC‑Cys复合材料修饰的玻碳电极表面,自然晾干,制得电化学发光适配体传感器;
所述复合材料Au@HKUST‑1/PTC‑Cys修饰玻碳电极的制备方法如下:S1.PTC‑Cys的制备:将苝四羧酸二酐溶解于氢氧化钠的水溶液中,然后向其中加入HCl,得到红色沉淀物,将红色沉淀物用去离子水洗涤以除去过量的反应物,然后经分散得到PTCA溶液,向PTCA溶液中依次加入1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐与N‑羟基丁二酰亚胺,并加入L‑半胱氨酸,继续搅拌,然后通过离心、干燥,制得粉红色粉末状产物PTC‑Cys;将PTC‑Cys分散于DMF中,使其分散均匀,得到PTC‑Cys的DMF分散液;
S2.Au@HKUST‑1的制备:将苯三甲酸、N,N‑二甲基甲酰胺与Au@Cu2O异质结的乙醇溶液混合,将混合物搅拌过夜,离心分离、洗涤,得到Au@HKUST‑1,将Au@HKUST‑1分散于N,N‑二甲基甲酰胺里,超声使其分散均匀,得到Au@HKUST‑1的DMF分散液;
S3.将玻碳电极抛光,依次用硝酸溶液、乙醇溶液和超纯水超声清洗,室温下吹干,获得前处理后的玻碳电极待用;依次移取步骤S1中PTC‑Cys的DMF分散液和步骤S2中的Au@HKUST‑1的DMF分散液并将其滴涂在经前处理后的玻碳电极表面,自然晾干,得到所述Au@HKUST‑1/PTC‑Cys复合材料修饰的玻碳电极。
2.根据权利要求1所述的电化学发光适配体传感器,其特征在于,所述适配体为含有
5'‑AGATGGGGGTTGAGGCTAAGCCGA‑3'碱基序列的适配体。
3.根据权利要求1所述的电化学发光适配体传感器,其特征在于,所述步骤S1中1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐与N‑羟基丁二酰亚胺的摩尔比为1:1‑4:1;所得PTC‑Cys的DMF分散液的浓度为1mg/mL。
4.根据权利要求1所述的电化学发光适配体传感器,其特征在于,所述步骤S2所得Au@HKUST‑1的DMF分散液的浓度为1mg/mL。
5.根据权利要求1所述的电化学发光适配体传感器,其特征在于,所述步骤S3中PTC‑Cys和Au@HKUST‑1的复合修饰的体积比为:4:1‑4:5。
6.根据权利要求1所述的电化学发光适配体传感器,其特征在于,所述将适配体负载在Au@HKUST‑1/PTC‑Cys纳米复合材料修饰的玻碳电极表面的具体方法为:首先向含有KCl、NaCl、MgCl2和乙二胺四乙酸的Tris‑HCl缓冲溶液中加入适配体,配制适配体浓度为2~10μM的适配体溶液,然后移取所述适配体溶液并将其滴涂在所述Au@HKUST‑1/PTC‑Cys复合材料修饰的玻碳电极表面。
7.根据权利要求1所述的电化学发光适配体传感器的应用方法,其特征在于,所述方法为:以电化学发光适配体传感器作为工作电极,Ag/AgCl为参比电极,铂丝电极为对电极组成三电极体系,样品中的卡那霉素被定量捕捉到传感器的表面,通过产生的发光信号实现卡那霉素的检测。
8.根据权利要求7所述的电化学发光适配体传感器的应用方法,其特征在于,所述应用方法的具体步骤为:
A1.含K2S2O8的PBS缓冲溶液的配制:用pH为7.4的0.1M的PBS缓冲溶液配制含0.05M K2S2O8的PBS缓冲溶液;
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A2.不同浓度的卡那霉素标准溶液的配制:首先配制1×10 M的卡那霉素溶液,用超纯水溶解,然后用超纯水稀释得到不同浓度的卡那霉素标准溶液,卡那霉素标准溶液的浓度‑13 ‑8
范围为1.0×10 ~1.0×10 M;
A3.标准曲线的绘制:将所述电化学发光适配体传感器置于步骤A2配制的不同浓度的卡那霉素标准溶液中浸泡相同时间,使电化学发光适配体传感器结合卡那霉素,然后取出并淋洗,作为工作电极,Ag/AgCl为参比电极,铂电极为对电极,组成三电极体系,以步骤A1中的含K2S2O8的PBS缓冲溶液为电解液,在‑1.7~0V的电化学窗口范围内,光电倍增管高压
800V,扫速0.1V/s,进行循环伏安扫描,记录发光强度‑时间曲线,建立电化学发光适配体传感器结合卡那霉素前后的发光强度差值与卡那霉素标准溶液中的卡那霉素浓度对数值的线性关系,得到相应的线性回归方程;
A4.样品中卡那霉素的检测:所述样品先经过预处理再用步骤A1中的含K2S2O8的PBS缓冲溶液调节pH,然后放入电化学发光适配体传感器浸泡相同时间,使电化学发光适配体传感器结合卡那霉素,然后取出并淋洗,作为工作电极,再采用步骤A3方法检测发光强度,再根据线性回归方程计算出样品中卡那霉素的浓度。