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专利号: 2020108073006
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种酪胺半抗原,其特征在于,具有如下所示的结构:式I。

2.权利要求1所述的酪胺半抗原的制备方法,其特征在于,其包括以下步骤:将酪胺与

4-甲酰基苯甲酸甲酯在甲醇中发生缩合反应后,经硼氢化钠还原,再经碱水解后得到具有如式I所示的分子结构的酪胺半抗原。

3.根据权利要求2所述酪胺半抗原的制备方法,其特征在于,具体包括如下步骤:S11.将酪胺与4-甲酰基苯甲酸混合后,溶于甲醇中,加热回流反应;

S12.加入硼氢化钠还原,冷凝回流;

S13.旋干后用水溶解,并用乙酸乙酯萃取,再将乙酸乙酯旋干;

S14.加入氢氧化钾水解,冷凝回流;

S15.旋干后溶解于饱和食盐水中,并用盐酸调节PH至弱酸,正丁醇萃取后得到如式I所示的酪胺半抗原。

4.一种酪胺人工抗原,其特征在于,具有如下式II所示分子结构:式II,

其中,载体蛋白为牛血清白蛋白或鸡卵清白蛋白。

5.权利要求4所述的酪胺人工抗原的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:将权力要求1所述的酪胺半抗原溶于DMF和水中,将蛋白溶解后加入,搅拌均匀后,再搅拌加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐,室温偶联过夜;偶联混合物低温下PBS透析,得到酪胺人工抗原。

6.根据权利要求5所述酪胺人工抗原的制备方法,其特征在于,具体包括如下步骤:S21. 将蛋白溶解于PBS的缓冲液中;

S22. 取酪胺半抗原溶解于N,N-二甲基甲酰胺和一级水中,并加入到S21所得的蛋白溶液中,搅拌;

S23.取EDC溶解于水中,再搅拌滴加到S22的蛋白-半抗原混合液中,室温避光偶联过夜;

S24.反应完成后,用PBS透析,得到酪胺人工抗原。

7.一种抗体,其特征在于,其采用如权利要求4所述酪胺人工抗原制备得到。

8.根据权利要求7所述的抗体,其特征在于,所述抗体为单克隆抗体、多克隆抗体或基因工程抗体。

9.权利要求4所述酪胺人工抗原或权利要求7所述抗体在酪胺免疫检测分析中的应用。

10.一种检测酪胺的免疫分析方法,其特征在于,包括如下步骤:S31. 将如权利要求2所述的酪胺人工抗原免疫动物制备酪胺的多克隆抗体;

S32. 将具有如下式III所示结构的酪胺人工抗原作为包被原包被在微孔板上;将步骤S31制备得到酪胺的多克隆抗体加入微孔板中;

式III,其

中载体蛋白为牛血清白蛋白或鸡卵清白蛋白;

S33. 加入待测样品,采用竞争ELISA测定待测样品中酪胺的含量。