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专利号: 2023102470725
申请人: 佛山职业技术学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2024-10-09
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.吡唑萘菌胺半抗原,其特征在于,其结构如式(Ⅰ)所示:

(Ⅰ)。

2.制备权利要求1所述的吡唑萘菌胺半抗原的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1. 在单口烧瓶中加入4,4‑二三氟乙酰乙酸乙酯、原甲酸三乙酯、乙酸酐,回流搅拌反应,反应结束后,减压蒸馏,得到中间体1;

S2. 将所述中间体1用乙醇溶解,加入水合肼,回流搅拌反应,反应结束后,减压旋蒸除去乙醇,加入适量水,用乙酸乙酯萃取2‑3遍,合并有机相后蒸干,过柱纯化,得到中间体2;

S3. 取所述中间体2、无水碳酸钾以及DMF加入到100mL单口烧瓶中搅拌均匀,再加入6‑溴‑1‑己烯,在85℃下搅拌反应,反应结束后,冷却至室温,油泵减压旋蒸,蒸出溶剂DMF,加入适量水,用乙酸乙酯萃取2‑3遍,合并有机相后蒸干,过柱纯化,得到中间体3;

S4. 将所述中间体3用甲醇溶解,再加入氢氧化钠溶液,回流搅拌反应过夜,反应结束后,用盐酸溶液调节体系为微酸性,用乙酸乙酯萃取2‑3遍,合并有机相用水洗并用无水硫酸钠干燥后蒸干,得到中间体4;

S5. 将所述中间体4用二氯甲烷溶解,再加入二氯亚砜,回流搅拌反应,反应结束后蒸干溶剂,得到中间体5;

S6. 将吡唑萘菌胺加入到单口烧瓶中,再加入甲醇使其完全溶解,再加入氢氧化钠溶液,回流搅拌反应,反应结束后,冷却至室温,减压旋蒸除去甲醇,加入盐酸溶液将体系pH调节至8左右,用乙酸乙酯萃取2‑3遍,合并有机相用水洗后蒸干,过柱纯化,得到中间体6;

S7. 取所述中间体6,用无水吡啶溶解,溶清后室温搅拌下滴加所述中间体5,滴加完毕后,室温下搅拌反应,反应结束后,油泵减压旋蒸,蒸出溶剂吡啶过柱纯化,得到中间体7;

S8. 取所述中间体7投入单口烧瓶中,加入乙腈、水,然后加入高碘酸钠,再加入三氯化钌,最后加入四氯化碳,将混合体系加热60℃回流反应,反应完成后过滤体系除去不溶物,浓缩后加水稀释,用乙酸乙酯萃取2‑3遍,合并有机相并用无水硫酸钠干燥后蒸干,过柱纯化,得到吡唑萘菌胺半抗原。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤S4中氢氧化钠溶液的质量体积分数为10%。

4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述盐酸溶液的摩尔浓度为6mol/L。

5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤S6中氢氧化钠溶液的质量体积分数为25%。

6.吡唑萘菌胺抗原,其特征在于,所述吡唑萘菌胺抗原为权利要求1所述的吡唑萘菌胺半抗原与载体蛋白的偶联物,所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白或人血清白蛋白中的一种。

7.吡唑萘菌胺抗体,其特征在于,所述吡唑萘菌胺抗体是由权利要求6所述的吡唑萘菌胺抗原经动物免疫制备得到,所述吡唑萘菌胺抗体为吡唑萘菌胺单克隆抗体。

8.权利要求1所述的吡唑萘菌胺半抗原、权利要求6所述的吡唑萘菌胺抗原在吡唑萘菌胺的免疫学检测中的应用。

9.权利要求7所述的吡唑萘菌胺抗体在吡唑萘菌胺的免疫学检测中的应用。

10.食品中吡唑萘菌胺残留的快速检测方法,其特征在于,所述方法为使用权利要求7所述的吡唑萘菌胺抗体对食品中残留的吡唑萘菌胺进行检测。