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专利号: 202010468547X
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种鱼安定半抗原,其特征在于,具有如下所示的结构

2.权利要求1所述的鱼安定半抗原的制备方法,其特征在于,其包括以下步骤:将鱼安定与对醛基苯甲酸在甲醇中发生缩合反应后,再经硼氢化钠还原得到具有如式I所示的分子结构的鱼安定半抗原。

3.根据权利要求2所述鱼安定半抗原的制备方法,其特征在于,具体包括如下步骤:S11.将鱼安定溶于适量的甲醇中;

S12.待S11溶解后加入三乙胺;

S13.将与S11等摩尔比的苯醛酸在适量甲醇中溶解后,搅拌条件下缓慢滴加到S1中;

S14.在预定温度下冷凝回流反应;

S15.加入硼氢化钠还原,在预定温度下冷凝回流;

S16.旋转蒸发干后得到黄色油状物质,水溶后用乙酸乙酯萃取,再将乙酸乙酯萃取液旋干,得到淡黄色粉末;

S17.将上述淡黄色粉末过硅胶柱,洗脱,然后蒸干所得即为如式I所示的鱼安定半抗原。

4.一种鱼安定人工抗原,其特征在于,具有如下式II所示分子结构:其中,载体蛋白为牛血清白蛋白或鸡卵清白蛋白。

5.权利要求4所述的鱼安定人工抗原的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:将如权利要求1所述的鱼安定半抗原溶于DMF中,将载体蛋白溶解后加入,搅拌均匀后,再搅拌加入

1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐,室温偶联过夜;偶联混合物于4℃下PBS透析,得到鱼安定人工抗原;其中所述鱼安定半抗原与载体蛋白的摩尔比为400‑600:1。

6.根据权利要求5所述鱼安定人工抗原的制备方法,其特征在于,具体包括如下步骤:S21.将载体蛋白溶解于PBS缓冲液中,得蛋白溶液;

S22.将如权利要求1的鱼安定半抗原溶解于N,N‑二甲基甲酰胺,并加入到S21所得的蛋白溶液中,搅拌混合得蛋白‑半抗原混合液;

S23.取EDC溶解于水中,再搅拌滴加到S22的蛋白‑半抗原混合液中,室温避光偶联过夜;

S24.反应完成后,用PBS透析,得到鱼安定人工抗原。

7.一种抗体,其特征在于,其采用如权利要求4所述鱼安定人工抗原制备得到。

8.根据权利要求7所述的抗体,其特征在于,所述抗体为单克隆抗体、多克隆抗体或基因工程抗体。

9.权利要求4所述人工抗原或权利要求7所述抗体在非诊断或治疗目的的鱼安定免疫检测分析中的应用。

10.一种非诊断或治疗目的的检测鱼安定的免疫分析方法,其特征在于,包括如下步骤:

S31.将如权利要求4所述的鱼安定人工抗原免疫动物制备鱼安定的多克隆抗体,其中载体蛋白为牛血清白蛋白;

S32.将如权利要求4所述的鱼安定人工抗原作为包被原包被在微孔板上,其中载体蛋白为鸡卵清白蛋白;将步骤S31制备得到鱼安定的多克隆抗体加入微孔板中;

S33.加入待测样品,采用竞争ELISA测定待测样品中鱼安定的含量。