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专利号: 2020103317767
申请人: 山东大学齐鲁医院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种检测痕量卡那霉素的可再生电化学传感器,其特征在于,包括以下步骤:在电极上依次修饰有H3层、磁珠-CP/H1/H2层、FP层;

所述的碱基序列:

CP碱基序列如SEQ No.1所示;具体为: 5’-COOH- TTTTTTGGGGGTTCCTTAACAG -3’;

H1碱基序列如SEQ No.2所示;具体为: 5’- TGGGGGTTGAGGCTAAGCCGACTTTTTTTTTTATCCTCAGCTGGAACCCCCA -3’;

H2碱基序列如SEQ No.3所示;具体为: 5’- CAGCTACTGTTAAAGCTGAGG -3’;

H3碱基序列如SEQ No.4所示;具体为: 5’-SH- TTTTTCTACTTTTTAACAGTAGCTG -MB-3’;

FP碱基序列如SEQ No.5所示;具体为: 5’- GCTTTAACAGTAGCTG -3’。

2.根据权利要求1所述的可再生电化学传感器,其特征在于,所述的生物传感器中磁珠-CP/H1/H2层中磁珠-CP、H1、H2的摩尔比为1:1:5。

3.权利要求1所述的可再生生物传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:对电极进行预处理;

将H3层修饰到电极表面;

磁珠提取水样中的Kana;

(4)将磁珠-CP/H1/H2层修饰到电极表面;

(5)将FP层修饰到电极表面。

4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(1)的操作步骤如下:将金电极在0.3 µm和0.05 µm的氧化铝浆中进行抛光处理,直到呈镜面,用PBS和二次水冲洗。

5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(2)的操作步骤如下:将H3滴加到经过预处理的电极表面,孵育,清洗。

6.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(3)的操作步骤如下:A1 将修饰了-COOH的CP链添加到磷酸盐缓冲液中,温育活化-COOH;

A2 然后将磁珠加入到上述溶液中,温育,得到磁珠-CP,PBS溶液中清洗三次;最后分散于超纯水中;

所述的磷酸盐缓冲液含有EDC、NHS,pH =6.8;

所述的磁珠为亲水性氨基磁珠。

7.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(4)的操作步骤如下:B1 将磁珠-CP、H1加入到待测水样中,震荡,温育;随后磁性分离去除上清液,获得磁珠-CP/H1/Kana,分散在超纯水中;

B2 取磁珠-CP/H1/Kana, PBS 缓冲液, H2,Nb.BbvCI酶与超纯水混合,震荡,温育,磁性分离,取上清液滴加到步骤(2)的修饰H3层的电极上,孵育,清洗;

B3检测电化学信号。

8.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(4)的操作步骤如下:将PBS缓冲液, FP滴加到已经完成电化学检测的电极上,孵育;完成电极的再生。

9.权利要求2所述的制备方法制备的可再生电化学传感器在检测水样中痕量卡那霉素的应用。

10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,过程为:以Ag/AgCl为参比电极,以Pt电极为对电极,电位设置为0到-0.5 V,脉冲宽度0.05 V,扫描速率为0.06 s,采用差分脉冲伏安法读取电信号的变化,检测待测目标物。