1.用于检测花生黑腐病菌的LAMP检测引物,其特征在于:所述LAMP检测引物,包括一对外引物和一对内引物;
外侧引物:
TF3:TGACACTGTGCTGACTCTCA,
TB3:GCTGAAGGACAGAAGCTGAG;
内侧引物:
TFIP:GCTTGTCAAGAACCCAGGCGT‑AAACAGGAAGCCGCTGAAC,TBIP:CCGAGCGTGAGCGTGGTATC‑GACGGTGACATCGTACTTGG。
2.利用权利要求1所述的LAMP检测引物用于检测花生黑腐病菌的方法,其特征在于:利用所述LAMP检测引物进行扩增,LAMP反应体系为25µl,包括5µM外侧引物TF3和TB3各0.25µl,40µM内侧引物TFIP和TBIP各0.25µl,反应混合液18.0µl,8UBst DNA 聚合酶1µl,DNA模板
25ng,用灭菌超纯水补足至25 µl;LAMP反应条件为60‑63℃温育60 min,82℃保温5min;所述的反应混合液中各组分的浓度为40mM Tris‑HCl,20mM (NH4)2SO4,20mM KCl,16mM MgSO4,0.2% Triton X‑100,1.6M Betaine,2.8 mM dNTPs;
在LAMP反应的扩增产物中加入显色剂SYBR green І 1µl,显色结果观察到绿色荧光判断为阳性,橙色判断为阴性;取2µl扩增产物用2%琼脂糖凝胶电泳检测,出现梯形条带判断为阳性,没有出现则判断为阴性。