利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2018113048539
申请人: 闽南师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种血清中胆固醇的检测方法,其特征在于:包括如下步骤:

(1)将β-CD@AuNPs、CQDs和适量以无水乙醇为溶剂制备的胆固醇储备液混合后,配制不同浓度的胆固醇标准溶液;将荧光激发波长固定在390nm,分别记录不同浓度的胆固醇标准溶液的荧光发射光谱,以荧光发射峰Em=528nm的强度作为定量依据,以荧光恢复效率(F-F0)/F0对不同胆固醇浓度做线性拟合,测定检测限,F0为不加胆固醇的荧光发射峰Em=

528nm的强度,F对应不同胆固醇标准溶液的浓度的荧光发射峰Em=528nm的强度;当胆固醇浓度为10-210μmol·L-1,荧光恢复效率(F-F0)/F0与胆固醇浓度呈现良好的线性关系,获得2

线性工作曲线y=0.0052x-0.0139,R=0.996,y=(F-F0)/F0,x为胆固醇浓度;上述β-CD@AuNPs是以氯金酸(HAuCl4)溶液为前驱体,以β-环糊精(β-CD)为还原剂和稳定剂,加热回流一步制备而成,上述CQDs是以氯化十六烷基吡啶(CPC)溶液为前驱体,通过超声一步法合成;

(2)将新鲜血液于室温下保存过夜,隔天取其中淡黄色的上清液离心,获得血清;在上述血清中加入0~160μmol·L-1的胆固醇标准溶液,根据步骤(1)的参数进行荧光测定,重复测定至少三次,获得相应的荧光发射峰Em=528nm的强度;

(3)将步骤(3)获得的荧光发射峰Em=528nm的强度代入上述线性工作曲线中,获得血清中的胆固醇浓度。

2.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于:所述β-CD@AuNPs的制备方法为:反应容器中先后加入超纯水,0.1mol·L-1且pH 7.0的PBS缓冲液,0.01mol·L-1的HAuCl4溶液和

0.01mol·L-1的β-CD水溶液,搅拌均匀后,移入油浴锅中,在100℃下强力搅拌回流60min,溶液颜色由浅黄色变成浅红色最终变为葡萄酒红,待溶液自然冷却后,经0.45μm滤膜过滤后于4℃下保存。

3.如权利要求2所述的循环使用方法,其特征在于:所述超纯水、PBS缓冲液、HAuCl4溶液和β-CD水溶液的体积比为35∶5∶1∶10。

4.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于:所述CQDs的制备方法为:往15mmol·L-1的CPC溶液中加入2.0mol·L-1的NaOH溶液,在超声30min后,用浓盐酸调节溶液pH值至7.0,使反应终止,再经透析袋透析24h后,冷冻干燥得到CQDs固体,根据实验需要的浓度将CQDs固体重新溶解于水,4℃保存;超声期间溶液颜色由无色变成浅黄最终变成棕黄色。

5.如权利要求4所述的检测方法,其特征在于:所述CPC溶液和NaOH溶液的体积比为100∶9。

6.如权利要求1至5中任一权利要求所述的检测方法,其特征在于:所述β-CD@AuNPs的平均粒径分别为24-26nm。

7.如权利要求1至5中任一权利要求所述的检测方法,其特征在于:所述CQDs的平均粒径分别为2.8-3.2nm。