1.一种基因,其特征在于:其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种重组载体,其特征在于:它包括SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的重组载体,其特征在于:所述重组载体是重组pGEX‑6P‑1。
4.一种重组菌,其特征在于:它包含权利要求2所述的重组载体。
5.根据权利要求4所述的重组菌,其特征在于:所述重组菌为Transetta (DE3)。
6.一种蛋白,其特征在于:其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
7.一种制备权利要求6所述蛋白的方法,其特征在于:它是采用权利要求4或5所述重组菌发酵制备。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:步骤如下:(1)取权利要求4或5所述重组菌,活化,得菌液;
(2)将菌液接种到LB培养基中培养,3 4h后,加入IPTG诱导剂诱导培养,收集菌体;
~
(3)破菌,离心,取上清,纯化,即可。
6
9.根据权利要求8所述方法,其特征在于:步骤(1)中,所述菌液的浓度为1×10~
7
10cfu/ml。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于:所述活化是采用含有Amp的LB培养基培养,培养时间是6‑10小时,培养温度为37℃。
11.根据权利要求8所述方法,其特征在于:步骤(2)中,所述菌液的接种比例为1:50;所述培养的温度是37℃,转速为200rpm;所述IPTG的浓度为1mol/L,加入量为培养液的1/
100000;诱导培养的温度是20℃,转速为160rpm。
12.根据权利要求8所述方法,其特征在于:步骤(3)中,所述纯化的方法为GST标签融合蛋白纯化方法。
13.根据权利要求12所述方法,其特征在于:所述纯化方法为:取上清,上树脂柱,穿流2次;采用Lysis buffer冲洗树脂去除杂蛋白;用15mmol/L还原型谷胱甘肽溶液洗脱,得蛋白。
14.根据权利要求13所述方法,其特征在于:所述树脂是Glutathione SepharoseTM 4B树脂;所述还原型谷胱甘肽溶液是还原型谷胱甘肽溶于Lysis buffer得到的溶液。
15.权利要求1 5任一所述的基因片段、重组载体、重组菌在制备高产根皮素8‑阿拉伯~
糖苷青稞品种的用途。