1.一种用于鉴定安吉小鲵(Hynobius amjiensis)的多重PCR引物,其特征在于,所述多重PCR引物包括如SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示的引物对1,以及如SEQ ID No:3和SEQ ID No:4所示的引物对2。
2.一种利用多重PCR鉴定安吉小鲵(Hynobius amjiensis)的方法,其特征在于,所述方法包括:
1)提取待测样品的总DNA;
2)采用根据权利要求1所述的多重PCR引物对步骤1)中提取的总DNA进行PCR扩增;
3)将步骤2)中得到的产物进行琼脂糖凝胶电泳检测;其中,在步骤3)中所得到的琼脂糖凝胶电泳图中,若含有步骤2)中得到的产物的泳道中出现
2条条带,则判断所述待测样品为来自安吉小鲵的样品,若含有步骤2)中得到的产物的泳道中不出现2条条带,则判断所述待测样品不是来自安吉小鲵的样品。
3.根据权利要求2所述的方法,其中,出现的2条条带中所含有的DNA片段的长度分别为
150bp和425bp。
4.根据权利要求2所述的方法,其中,相对于30μL的PCR扩增体系的总体积,每条引物的浓度为0.2-0.5pmol/L,DNA模板的用量为40-60ng。
5.根据权利要求2-4中任意一项所述的方法,其中,所述PCR扩增过程的变性温度为92-
98℃,变性时间为35-45s。
6.根据权利要求2-4中任意一项所述的方法,其中,所述PCR扩增过程的退火温度为55-
60℃,退火时间为25-35s。
7.一种根据权利要求1所述的多重PCR引物或权利要求2-6任意一项所述的方法在鉴定安吉小鲵(Hynobius amjiensis)中的应用。