1.一种与小麦抗白粉病基因PmL424紧密连锁的分子标记,该分子标记为YTU024‑L10,其上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;使用分子标记YTU024‑L10的标记引物对待测小麦基因组DNA进行PCR扩增,获得对应的扩增产物分子量为238 bp,即为与小麦抗白粉病基因PmL424紧密连锁的分子标记。
2.根据权利要求1所述的与小麦抗白粉病基因PmL424紧密连锁的分子标记,所述标记适用的PCR扩增体系为10 μL,其中包括:50 ng/μL小麦基因组DNA 1.0 μL,4 μL PCR MasterMix,5 μM上游引物0.25 μL,5 μM下游引物0.25 μL,无菌去离子水4.5 μL。
3.根据权利要求1或2所述的与小麦抗白粉病基因PmL424紧密连锁的分子标记,所述标记适用的PCR扩增程序为:95℃预变性2 min;95℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸40 s,
35个循环;72℃延伸10 min;4℃保存。
4.一种权利要求1‑3任意一项所述的与小麦抗白粉病基因PmL424紧密连锁的分子标记在小麦抗白粉病基因PmL424的基因定位、图位克隆以及分子标记辅助育种中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,检测待测品种中是否携带小麦抗白粉病基因PmL424主要包括以下步骤:(1)提取待测小麦样品的基因组DNA;
(2)使用分子标记YTU024‑L10的引物对所提取的小麦基因组DNA进行PCR扩增,获得扩增产物;
(3)对扩增产物进行电泳,根据电泳结果进行判断,若该小麦DNA能扩增出238 bp的特异条带,说明待测小麦中存在抗白粉病基因PmL424;否则,待测小麦中不存在小麦抗白粉病基因PmL424。
6. 根据权利要求5所述的应用,步骤(2)所述分子标记YTU024‑L10的引物包括上游引物YTU024‑L10‑F和下游引物YTU024‑L10‑R,所述上游引物YTU024‑L10‑F的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述下游引物YTU024‑L10‑R的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
7.根据权利要求5所述的应用,所述标记适用的PCR扩增体系为10 μL,包括:50 ng/μL小麦基因组DNA 1.0 μL,4 μL PCR MasterMix,5 μM上游引物0.25 μL,5 μM下游引物0.25 μL,无菌去离子水4.5 μL。
8.根据权利要求5所述的应用,所述标记适用的PCR扩增程序为:95℃预变性2 min;95℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸40 s,35个循环;72℃延伸10 min;4℃保存。