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专利号: 2025101086192
申请人: 西南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种柑橘全爪螨对乙唑螨腈抗性的分子标记,其特征在于:所述分子标记为柑橘全爪螨琥珀酸脱氢酶SDHD亚基基因的CDS发生SNP突变后的序列,所述CDS序列如SEQ ID No:

30所示,所述SNP突变为如SEQ ID No:30所示的序列发生A269G或T270A突变。

2.根据权利要求1所述的分子标记,其特征在于:所述SNP突变A269G导致第90位氨基酸由天冬氨酸突变为甘氨酸;所述SNP突变T270A导致第90位氨基酸由天冬氨酸突变为谷氨酸。

3.权利要求1所述的分子标记在检测柑橘全爪螨对乙唑螨腈的抗性中的应用。

4.一种柑橘全爪螨对乙唑螨腈抗性的分子标记的检测方法,其特征在于:先提取待测柑橘全爪螨的总DNA,以总DNA为模板,用引物对进行PCR扩增,得到包含突变区域的琥珀酸脱氢酶SDHD亚基基因片段,将得到的基因片段与权利要求1中的柑橘全爪螨对乙唑螨腈的分子标记进行序列比对,即可判断待测柑橘全爪螨对乙唑螨腈的抗性;所述引物对为SDHD‑F/SDHD‑R,引物序列为:SDHD‑F: 5’‑TCAAATCTCACCGAACTCAA‑3’;

SDHD‑R:5’‑ GGTTGATGTTTGTTCCGATT‑3’。

5.根据权利要求4所述的检测方法,其特征在于:如果PCR扩增得到的基因片段序列为权利要求1所述的分子标记的序列,则判断待测柑橘全爪螨对乙唑螨腈具有抗性。

6.如权利要求4所述的检测方法,其特征在于:所述PCR扩增的反应体系为:2  × Phanta Max Master Mix 25 μL,浓度10 μM的正反向引物各2 μL,待测样本DNA模板2 µL,补充ddH2O至50μL。

7.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于:所述PCR的扩增程序为:95℃预变性3 min;然后95℃变性15 sec,56℃退火15 sec,72℃延伸30 sec,40个循环;最后72℃延伸

5min。