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专利号: 2020109210513
申请人: 西南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种柑橘全爪螨对双甲脒抗性的分子标记,其特征在于:所述分子标记为柑橘全爪螨β-2R章鱼胺受体基因SNP突变T752C。

2.如权利要求1所述的分子标记,其特征在于:其核苷酸序列如SEQ ID No:5所示。

3.如权利要1或2所述的分子标记在柑橘全爪螨对双甲脒敏感品系和抗性品系的分类中的应用。

4.检测权利要求1或2所述的分子标记的特异性正反向引物,其特征在于:所述引物序列如下:F:5’-AACCTTCAGAATCAGTGTAATCATC-3’;

R:5’-CTTCCATAGATTGTTGTTGTTGTTG-3’。

5.一种柑橘全爪螨对双甲脒抗性的分子标记的检测方法,其特征在于:先提取待测柑橘全爪螨的总DNA,以总DNA为模板用权利要求4中的特异性正反向引物进行PCR扩增,得到包含突变区域的β-2R章鱼胺受体基因片段,将得到的基因片段与权利要求1中的柑橘全爪螨对双甲脒的分子标记进行序列比对,即可判断该品系是对双甲脒的敏感品系还是抗性品系。

6.如权利要求5所述的检测方法,其特征在于:所述PCR扩增的反应体系为:2×Phanta Max Master Mix 25μL,浓度10μM的正反向引物各2μL,待测样本DNA模板2μL,补充ddH2O至

50μL。

7.如权利要求5或6所述的检测方法,其特征在于:所述PCR的扩增程序为:95℃预变性

3min;然后95℃变性15sec,54℃退火15sec,72℃延伸10sec,40个循环;最后72℃延伸5min。