1.一种D‑阿洛酮糖6‑磷酸磷酸酶突变体,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO.10或SEQ ID NO.12所示。
2.一种编码如权利要求1所述的D‑阿洛酮糖6‑磷酸磷酸酶突变体的编码基因,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.9或SEQ ID NO.11所示。
3.含有如权利要求2所述的编码基因的重组载体。
4.含有如权利要求3所述的重组载体的重组基因工程菌。
5.如权利要求1所述的D‑阿洛酮糖6‑磷酸磷酸酶突变体在催化D‑阿洛酮糖6‑磷酸制备D‑阿洛酮糖中的应用。
6.如权利要求1所述的D‑阿洛酮糖6‑磷酸磷酸酶突变体在偶联阿洛酮糖6‑磷酸3‑差向异构酶催化D‑果糖6‑磷酸制备D‑阿洛酮糖中的应用。
7.一种制备D‑阿洛酮糖的方法,其特征在于,所述的方法包括以下步骤:以含有如权利要求1所述的D‑阿洛酮糖6‑磷酸磷酸酶突变体编码基因的工程菌经发酵培养后离心获得湿菌体、用缓冲液重悬后超声破碎、离心,上清液在水浴中热处理后再次离心的上清液为催化剂,偶联阿洛酮糖6‑磷酸3‑差向异构酶,以D‑果糖6‑磷酸为底物,以HEPES缓冲液为反应介质的情况下进行反应,冰浴并加入HCl终止反应,反应结束后,将反应液分离纯化,获得D‑阿洛酮糖。
8.如权利要求7所述的一种制备D‑阿洛酮糖的方法,其特征在于,所述工程菌发酵培养方法为:重组工程菌接种至含卡那霉素的LB液体培养基中培养,得到种子液;种子液接种至新鲜的含有卡那霉素的LB液体培养基中,振荡培养至菌体OD600为0.6~0.8,加入异丙基‑β‑D‑硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),诱导培养,离心收集菌体细胞。
9.如权利要求7所述的一种制备D‑阿洛酮糖的方法,其特征在于,所述工程菌发酵培养方法为:重组工程菌接种至含卡那霉素的LB液体培养基中培养,得到种子液;种子液接种至新鲜的含有卡那霉素的LB液体培养基中,振荡培养至菌体OD600为0.6~0.8,加入异丙基‑β‑D‑硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),诱导培养,离心收集菌体细胞。