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专利号: 2023113515452
申请人: 西部(重庆)科学城种质创制大科学中心
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种鉴别克氏原螯虾遗传性别的分子标记,其特征在于:所述分子标记位于克氏原螯虾NC_059608.1染色体上第18720238位碱基处的一段长60 bp的缺失的核苷酸序列,为SEQ ID NO.1所示,雌性个体没有SEQ ID NO.1序列缺失片段,雄性个体有SEQ ID NO.1序列缺失片段。

2.一种用于检测如权利要求1所述分子标记进而鉴定克氏原螯虾性别的引物对,其特征在于,所述引物对前引物F1,核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示,后引物R1,核苷酸序列为SEQ ID NO.3所示。

3.一种利用如权利要求2所述引物对鉴别克氏原螯虾遗传性别的检测方法,其特征在于:其包括提取待测基因组DNA,采用所述特异性引物进行PCR扩增,对克氏原螯虾的遗传性别进行判断;所述对克氏原螯虾的遗传性别进行判断是仅存在668bp特异性片段的个体为雌性克氏原螯虾,有668 bp 和608 bp两条片段的个体为雄性克氏原螯虾。

4.一种利用如权利要求2所述引物对鉴别克氏原螯虾遗传性别的检测方法,其特征在于,具体方法如下:

(1)提取待测基因组DNA;

(2)以待测基因组DNA为模板,采用所述特异性引物进行PCR扩增,PCR反应体系为:PCR反应体系为:TakaRa Taq Version 2.0 plus one dye的 Premix Taq 10 μL,10 mM的正向、反向引物各0.8μL,模板 DNA 0.4μL, ddH2O 8μL;

PCR反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s, 53 ℃退火30 s, 72 ℃ 延伸45 s,循环30次; 72 ℃延伸10 min;

(3)根据电泳图对克氏原螯虾的遗传性别进行判断,仅存在668bp特异性片段的个体为雌性克氏原螯虾,有668 bp 和608 bp两条片段的个体为雄性克氏原螯虾。

5.一种鉴别克氏原螯虾性别的试剂盒,其特征在于:包含有核苷酸序列为SEQ ID NO.1的Indel分子标记,SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的引物对。