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专利号: 2022100300852
申请人: 西南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种鉴别长吻鮠遗传性别的分子标记,其特征在于:所述分子标记为长吻鮠第7号染色体第1130404位碱基处一段长32bp的插入/缺失的核苷酸序列,为SEQ ID NO.1所示,雌性个体具有SEQ ID NO.1序列,雄性个体缺失SEQ ID NO.1序列。

2.用于检测权利要求1所述分子标记的特异性引物,其特征在于:前引物F1,核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示,后引物R1,核苷酸序列为SEQ ID NO.3所示。

3.采用如权利要求1所述分子标记鉴别长吻鮠遗传性别的检测方法,其特征在于:(1)提取待测基因组DNA;

(2)以待测基因组DNA为模板,采用权利要求2所述特异性引物进行PCR扩增,PCR反应体+

系为:10 x Buffer (Mg free) 1 μL,25 mM MgCl2 1μL,dNTP Mix (10 mm each) 1.6μL,正向、反向引物 (10 mm) 各1μL,模板 DNA 1μL, TaqDNA聚合酶 (5U/μL) 0.2 μL,ddH2O 

13.2μL;

PCR反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s, 50 ℃退火30 s, 72 ℃ 延伸45 s左右,循环30次; 72 ℃延伸10 min;

(3)根据电泳图对长吻鮠的遗传性别进行判断,仅存在410bp特异性片段的个体为雌性长吻鮠,有410 bp 和378 bp两条片段的个体为雄性长吻鮠。

4.一种用于鉴别长吻鮠遗传性别的试剂盒,其特征在于:该试剂盒包括如下引物,前引物为F1,核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示,后引物为R1,核苷酸序列为SEQ ID NO.3所示。