1.一对检测不同花斑棘胸蛙的特异性引物，其特征在于，包括：

核苷酸序列如SEQ ID NO  .2所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO  .3所示的反向引物。

2.一种检测不同花斑棘胸蛙的方法，所述方法通过应用权利要求 1所述的一对检测不同花斑棘胸蛙的特异性引物对棘胸蛙的总DNA进行PCR扩增，观测其琼脂糖凝胶电泳条带结果，以鉴定不同花斑的棘胸蛙，所述不同花斑的棘胸蛙为金线棘胸蛙、黑斑棘胸蛙和黑白斑棘胸蛙。

3.根据权利要求2所述的一种检测不同花斑棘胸蛙的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：S1、获取棘胸蛙的COI序列，提取总DNA；

S2、PCR扩增：以提取到的棘胸蛙总DNA为模板，利用核苷酸序列如SEQ ID NO  .2所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO  .3所示的反向引物组成的一对特异性COI引物进行PCR扩增获得扩增产物；

S3、琼脂糖凝胶电泳检测：通过琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物，若凝胶电泳结果出现一条大小为700bp的高亮扩增条带时，则判断待检棘胸蛙为黑斑棘胸蛙和黑白斑棘胸蛙，无条带的为金线棘胸蛙；

S4、测序：将PCR产物送往纯化与双向测序。

4.根据权利要求3所述的一种检测不同花斑棘胸蛙的方法，其特征在于，在获取棘胸蛙的COI序列步骤中，所述棘胸蛙为金线棘胸蛙、黑斑棘胸蛙和黑白斑棘胸蛙。

5.根据权利要求3所述的一种检测不同花斑棘胸蛙的方法，其特征在于，在获取棘胸蛙的COI序列步骤中，所述步骤是通过生物工程Ezup柱式动物组织基因组DNA抽提试剂盒进行总DNA提取。

6.根据权利要求3所述的一种检测不同花斑棘胸蛙的方法，其特征在于，在PCR扩增步骤中，所述PCR扩增程序为：95 ℃预变性 5 min；94℃变性30s，63℃退火30s，72℃延伸30s，

10个循环；95℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸30s，30个循环；72℃延伸10 min；4℃保存。

7.根据权利要求3所述的一种检测不同花斑棘胸蛙的方法，其特征在于，在琼脂糖凝胶电泳检测步骤中，电泳程序为取PCR产物5μL用 1.0% 琼脂糖凝胶电泳检测，使用Marker 为DL2000 DNA marker，300V电压下10min,获取鉴定胶图。