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专利号: 2024105295031
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种甲苯咪唑半抗原,其特征在于,结构式如式I所示;

2.根据权利要求1所述甲苯咪唑半抗原的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、以DMSO为溶剂,甲苯咪唑、叔丁醇钾和4‑溴丁酸叔丁酯完全反应,萃取并合并有机相得到甲苯咪唑半抗原中间产物;

S2、步骤S1所得中间产物溶于三氟乙酸和二氯甲烷的混合溶液中,水解旋蒸除去溶剂,再通过纯化干燥得甲苯咪唑半抗原。

3.根据权利要求2所述的甲苯咪唑半抗原的制备方法,其特征在于,所述甲苯咪唑、叔丁醇钾和4‑溴丁酸叔丁酯的摩尔比是34:41:34;所述三氟乙酸和二氯甲烷的混合溶液的三氟乙酸和二氯甲烷的体积比是1:2。

4.一种甲苯咪唑人工抗原,其特征在于,其由权利要求1所述的甲苯咪唑半抗原与载体蛋白以摩尔比为1:100进行偶联后得到;所述甲苯咪唑人工抗原的结构式如式(II)所示。

5.根据权利要求4所述的甲苯咪唑人工抗原,其特征在于,所述载体蛋白是鸡卵清蛋白或乳铁蛋白。

6.由权利要求5所述的甲苯咪唑人工抗原制备得到的甲苯咪唑单克隆抗体,其特征在于,所述载体蛋白是乳铁蛋白。

7.一种将权利要求5所述甲苯咪唑人工抗原和权利要求6所述的甲苯咪唑单克隆抗体应用于制备检测甲苯咪唑试纸条的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、将时间分辨荧光微球清洗、活化后用pH8.0的50 mM MES缓冲溶液进行复溶,然后与甲苯咪唑单克隆抗体偶联制成荧光探针;

S2、将鸡卵清蛋白为载体蛋白的甲苯咪唑人工抗原和羊抗鼠IgG二抗分别喷涂于硝酸纤维素膜上的检测线T和质控线C上;

S3、将荧光探针喷涂于经结合垫处理液浸泡后的结合垫上,所述结合垫处理液由制成;

S4、将结合垫、硝酸纤维素膜、吸水纸依次搭接于底板上组合成试纸条;

S5、制备上样稀释液,其由0.01mol/L PBS缓冲溶液中加入PVP 1% w/w和甲醇10% w/w制成。

8.根据权利要求7所述的制备检测甲苯咪唑试纸条的方法,其特征在于,步骤S1中每50 µL时间分辨荧光微球偶联40 µg甲苯咪唑单克隆抗体。

9.根据权利要求7所述的制备检测甲苯咪唑试纸条的方法,其特征在于,步骤S2中将

1.4mg/mL的甲苯咪唑人工抗原和0.05 mg/mL的羊抗鼠IgG二抗按划膜速度为1µL/cm分别喷涂于检测线T和质控线C上;步骤S3中将5µL荧光探针加入到60 µL荧光稀释液后按2µL/cm喷涂于结合垫上。

10.根据权利要求7所述的制备检测甲苯咪唑试纸条的方法,其特征在于,步骤S5中结合垫处理液由20mM柠檬酸钠缓冲溶液中添加海藻糖0% 10% w/w、酪蛋白0% 2% w/w和~ ~Tween‑20 0% 0.4% w/w后制成。

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