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专利号: 2023102089292
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-25
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种高产L‑高丝氨酸的无质粒重组大肠杆菌,其特征在于:由以下方法构建而成:

(1)以Escherichia coli HS33为底盘菌株,将菌株E.coli HS33基因组中的fliK基因用thrA*基因代替,得到重组菌株E. coli HS33ΔfliK :: thrA*;

(2)将菌株E. coli HS33ΔfliK :: thrA*基因组中的ompT基因用ppc基因代替,得到重组菌株 E. coli H‑1ΔompT :: ppc;

(3)将菌株E. coli H‑1ΔompT :: ppc基因组中的yeeJ基因用aspA基因代替,得到重组菌株E. coli H‑2ΔyeeJ :: aspA;

(4)将菌株E. coli H‑2ΔyeeJ :: aspA基因组中的yjiP基因用pntA和pntB基因代替,得到重组菌株 E. coli H‑3ΔyjiP :: pntA‑pntB;

(5)将菌株E. coli H‑3ΔyjiP :: pntA‑pntB基因组中的相邻ltaE基因和poxB基因用thrA*基因代替,得到重组菌株E. coli H‑4ΔyjiP :: pntA‑pntB :: thrA*;

(6)将菌株E. coli H‑4ΔyjiP :: pntA‑pntB :: thrA*基因组中的yjiV基因用ppc基因代替,得到重组菌株E. coli H‑5ΔyjiV :: ppc;

(7)将菌株E. coli H‑5ΔyjiV :: ppc基因组中的yeeL基因用aspA基因代替,得到重组菌株E. coli H‑6ΔyeeL :: aspA;

(8)将菌株E. coli H‑6ΔyeeL :: aspA基因组中的nuoG基因用pntA和pntB基因代替,得到E. coli H‑7ΔnuoG :: pntA‑pntB,即所述高产L‑高丝氨酸的无质粒重组大肠杆菌。

2. 如权利要求1所述的一种高产L‑高丝氨酸的无质粒重组大肠杆菌,其特征在于:所述fliK基因序列如SEQ ID No.6所示,所述thrA*基因序列如SEQ ID No.1所示。

3. 如权利要求1所述的一种高产L‑高丝氨酸的无质粒重组大肠杆菌,其特征在于:所述ompT基因序列如SEQ ID No.7所示,所述ppc基因序列如SEQ ID No.2所示。

4. 如权利要求1所述的一种高产L‑高丝氨酸的无质粒重组大肠杆菌,其特征在于:所述yeeJ基因序列如SEQ ID No.8所示,所述aspA基因序列如SEQ ID No.3所示。

5. 如权利要求1所述的一种高产L‑高丝氨酸的无质粒重组大肠杆菌,其特征在于:所述yjiP基因序列如SEQ ID No.9所示,所述pntA基因序列如SEQ ID No.13所示,所述pntB基因序列如SEQ ID No.14所示。

6. 如权利要求1所述的一种高产L‑高丝氨酸的无质粒重组大肠杆菌,其特征在于:所述ltaE基因序列如SEQ ID No.4所示,所述poxB基因序列如SEQ ID No.5所示。

7. 如权利要求1所述的一种高产L‑高丝氨酸的无质粒重组大肠杆菌,其特征在于:所述yjiV基因序列如SEQ ID No.10所示。

8. 如权利要求1所述的一种高产L‑高丝氨酸的无质粒重组大肠杆菌,其特征在于:所述yeeL基因序列如SEQ ID No.11所示。

9. 如权利要求1所述的一种高产L‑高丝氨酸的无质粒重组大肠杆菌,其特征在于:所述nuoG基因序列如SEQ ID No.12所示。

10.如权利要求1‑9之一所述的无质粒重组大肠杆菌在微生物发酵制备L‑高丝氨酸中的应用。