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专利号: 2023100387013
申请人: 四川轻化工大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.斑马鱼肠炎模型的构建方法,其特征在于,利用光照进行睡眠剥夺结合低浓度果糖溶液的方法处理诱导斑马鱼胚胎;

其中,所述低浓度果糖溶液的质量分数为1.0%‑3.0%。

2.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述斑马鱼胚胎挑选2‑2.5 dpf发育正常的斑马鱼胚胎。

3.如权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述斑马鱼胚胎挑选2 dpf发育正常的斑马鱼胚胎。

4.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述利用光照进行睡眠剥夺结合低浓度果糖的具体方法为:将斑马鱼胚胎移入含有低浓度果糖溶液的胚胎培养水中,在28‑28.5℃下实施强度为200‑300lux不间断的光照进行睡眠剥夺培养,每隔22‑24 h换液,培养3‑3.5 d。

5.如权利要求4所述的构建方法,其特征在于,将斑马鱼胚胎移入含有低浓度果糖溶液的胚胎培养水中,在28‑28.5℃下实施不间断的光照条件进行睡眠剥夺,每隔24 h换液,培养3 d。

6.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述低浓度果糖溶液的质量分数为

2.0%。

7.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述斑马鱼为转基因标记品系。

8.如权利要求7所述的构建方法,其特征在于,所述转基因标记品系为Tg(lyz:Dsred)。

9.如权利要求1‑8任一所述构建方法得到的斑马鱼肠炎模型的评估方法,其特征在于,包含以下(a)‑(c)中任一种或多种:(a)利用荧光显微镜观察斑马鱼肠道中性粒聚集情况,同时利用ImageJ软件对肠道中性粒数量进行定量分析,并通过qPCR检测斑马鱼胚胎中相关炎症因子;

(b)利用荧光显微镜拍摄并结合DCFH‑DA染色观察斑马鱼肠道内ROS生成量,并通过相应的酶活试剂盒检测斑马鱼胚胎的CAT和SOD酶活力以及MDA含量;

(c)斑马鱼肠道组织切片进行苏木素伊红(HE)染色观察斑马鱼肠道组织的病理情况。