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专利号: 2022115479422
申请人: 江苏海洋大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种可降解果聚糖的外切左聚糖酶,是由SEQ ID NO.1序列组成的蛋白。

2.编码权利要求1所述的外切左聚糖酶的基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.含有权利要求2所述的编码外切左聚糖酶基因的重组载体。

4.根据权利要求3所述的重组载体,其特征在于,以pET系列作为载体,将权利要求2所述基因去除信号肽编码序列,插入NdeI和HindIII作为两个酶切位点间所得;

所述的信号肽氨基酸序列为

MKNCLPRNRFRTIAAATTVAVAATFGATAVAPAHA。

5.权利要求4所述的重组载体的制备方法:

步骤1,以微杆菌XL1总DNA为模板,进行PCR扩增,得到PCR回收片段;

步骤2,将其与pET28a质粒分别用NdeI和HindIII进行双酶切反应,目的基因与线性质粒载体用solution I连接,得到连接产物;

步骤3,上述连接产物经培养后,得到重组载体pET28a‑rMle3A。

6.含有权利要求2所述的编码外切左聚糖酶基因的重组菌株。

7.权利要求6所述的重组菌株的制备方法,其特征在于,将权利要求5中所述的连接产物转化至表达宿主菌E.coli BL21(DE3)中进行重组表达。

8.权利要求1或2在降解果聚糖中的应用,其特征在于,用于水解左聚糖、菊粉、蔗糖。

9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,左聚糖、菊粉的最终水解产物为果糖。

10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,用于高果糖浆及结晶果糖的生产。