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专利号: 2022112968624
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种构建Hmox1诱导性基因敲除小鼠动物模型的方法,其特征在于,所述方法为:(1)针对FloxP位点设计Cas9/gRNA和Donor DNA质粒;

(2)将Donor DNA质粒以及Cas9/gRNA植入野生型小鼠的受精卵中,并将受精卵移植至野生型小鼠,该小鼠产下仔鼠即F0代小鼠;

(3)将F0代小鼠与野生型小鼠杂交,获得F1代杂合子;

(4)将F1代杂合子互配,繁育得到F2代小鼠,即为Hmox1‑FloxP小鼠;

(5)将Hmox1‑FloxP小鼠与组织特异性表达Cre的小鼠杂交获得稳定遗传子代。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,在第二个外显子的两边定点插入FloxP位点。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述第二外显子的氨基酸序列如SEQ IDNO.28所示。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,gRNA的序列如SEQ ID NO.25或SEQ ID NO.26所示。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,利用显微注射技术将Donor DNA质粒以及Cas9/gRNA植入野生型小鼠的受精卵中。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)和(3)中,野生型小鼠的品系为C57BL/6。

7.根据权利要求1~6任一所述方法构建得到的小鼠在研究与Hmox1基因缺陷相关疾病中的应用,所述应用不以疾病的诊断或治疗为目的。

8.根据权利要求1~6任一所述方法构建得到的小鼠在筛选用于治疗或预防Hmox1基因相关疾病的药物中的应用,所述应用不以疾病的诊断或治疗为目的。

9.根据权利要求1~6任一所述方法构建得到的小鼠在研究Hmox1基因相关功能与作用机理中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述应用为研究Hmox1基因与海水淹溺性肺损伤的相关机理。