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专利号: 2022111482587
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-25
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种膨大弯颈霉(Tolypocladium inflatum)在不对称还原潜手性酮化合物生物催化制备手性芳香醇中的应用,所述膨大弯颈霉为膨大弯颈霉(Tolypocladium inflatum)ZJPH2105,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2022年8月29日,保藏编号:CCTCC NO:M 20221346,地址:中国,武汉,武汉大学,430072;所述的不对称还原潜手性酮化合物为式I所示酮类化合物,所述的,所述的式II所示手性芳香醇类化合物如式II所示;

I II

其中式I、式II,R1为H、卤素、NO2、OCH3或CF3,R2为C1‑C4烷基或CF3。

2.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述的应用为:以膨大弯颈霉经发酵培养获得的湿菌体为酶源细胞,以式I所示酮类化合物为底物,加入辅助底物,以pH 6.0‑8.0的磷酸盐缓冲液为反应介质构成转化体系,在16‑37℃、100‑200 rpm条件下进行反应,反应结束后将反应液进行分离纯化,获得式II所示手性芳香醇类化合物;所述辅助底物为葡萄糖、麦芽糖、果糖、甲醇、异丙醇或甘油;所述湿菌体的质量以缓冲液体积计为50‑400 g/L;所述底物的浓度以缓冲液体积计为5‑30 mmol/L;当所述辅助底物为葡萄糖、麦芽糖、果糖或甘油时,所述辅助底物的质量以缓冲液体积计为20‑200 g/L,当所述辅助底物为甲醇或异丙醇时,所述辅助底物的体积为所述缓冲液的体积的5‑20%;

I II

其中,R1为H、卤素、NO2、OCH3或CF3,R2为C1‑C4烷基或CF3。

3.如权利要求2所述的应用,其特征在于:R1为Cl、Br或CF3,R2为CH3或CF3。

4.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述式I化合物为下列之一:4'‑溴‑2,2,2‑三氟苯乙酮、4'‑溴苯乙酮、4'‑氯苯乙酮、4'‑三氟甲基苯乙酮。

5.如权利要求2所述的应用,其特征在于:所述反应的温度为25℃‑30℃。

6.如权利要求2所述的应用,其特征在于:所述辅助底物为甘油,所述辅助底物的质量以缓冲液体积计为50 g/L。

7.如权利要求2所述的应用,其特征在于:所述磷酸盐缓冲液的pH值为7.0。

8.如权利要求2所述的应用,其特征在于:所述底物的浓度以缓冲液体积计为10 mmol/L。

9.如权利要求2所述的应用,其特征在于:所述湿菌体的质量以缓冲液体积计为200‑

350 g/L。

10.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述湿菌体按如下方法获得:

1)斜面培养:将膨大弯颈霉(Tolypocladium inflatum)ZJPH2105接种至斜面培养基中,25°C恒温培养6 d;

2

2)液体培养:从步骤1)中所得的斜面菌种挖取1 cm大小的菌块接入液体培养基中,16‑

37°C、120‑250 rpm条件下发酵培养2‑5 d,所得发酵液离心,所得沉淀用0.1 M,pH值 7.0的K2HPO4‑KH2PO4缓冲液洗涤,离心,获得所述湿菌体。