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专利号: 202210678501X
申请人: 南京师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-08-18
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种制备高产EPA裂殖壶菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1:选取对数时期的裂殖壶菌,用无菌蒸馏水制成菌悬液;

S2:将菌悬液置于ARTP诱变仪内进行辐照处理;

S3:取辐照后的菌悬液稀释后均匀涂布在固体平板上,于培养箱中避光保存;

S4:挑选单菌落摇瓶发酵培养,筛选辐照后致死率高的菌液作为出发菌株;

S5:通过2‑DG平板筛选,选择致死率90%的筛选平板上的菌株进行后续发酵培养,检测EPA产量;

S6:根据EPA产量筛选高产EPA的裂殖壶菌菌株。

2.根据权利要求1所述的制备高产EPA裂殖壶菌的方法,其特征在于,所述菌悬液是在裂殖壶菌对数时期使用无菌蒸馏水配制而成,所述菌悬液的细胞浓度OD600值为0.6~0.8。

3.根据权利要求1所述的制备高产EPA裂殖壶菌的方法,其特征在于,使用ARTP诱变仪对菌悬液进行辐照处理包括以下步骤:S21:取菌悬液涂布在无菌载片上,将无菌载片转移至ARTP诱变仪凹槽内,凹槽下放置EP管;

S22:开启ARTP诱变仪,设定辐射时间为20s,功率为110w,气量为10SLM;

S23:诱变完毕将载片转移至装有1mL浓度为1mol/L山梨醇的EP管内,振荡洗脱形成新的菌悬液。

4.根据权利要求1所述的制备高产EPA裂殖壶菌的方法,其特征在于,所述避光保存温度为26~30℃,培养时间为3d。

5.根据权利要求1所述的制备高产EPA裂殖壶菌的方法,其特征在于,所述发酵培养选择的发酵培养基的组分以质量份计,每1000份发酵培养基包括:硫酸钠12份,七水硫酸镁2份,硫酸铵4份,氯化钾0.5份,硫酸钾0.65份,氯化钙0.17份,味精10份,苹果酸0.6份,葡萄糖50份,磷酸二氢钾1份,酵母粉10份,玉米浆干粉5份,余量为无菌水。

6.根据权利要求1至5任一项所述制备高产EPA裂殖壶菌的方法在生产高产EPA裂殖壶菌中的应用。