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专利号: 2022103286819
申请人: 南京师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-08-18
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种裂殖壶菌发酵生产EPA和DHA的方法,以裂殖壶菌为生产菌株发酵生产多不饱和脂肪酸,其特征在于,在发酵培养基中添加恩西地平;

其中,发酵培养基和恩西地平的用量比例为1L:1 50mmol;

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所述裂殖壶菌为裂殖壶菌HX‑308,其保藏编号为CCTCC No.M209059。

2.根据权利要求1所述的裂殖壶菌发酵生产EPA和DHA的方法,其特征在于,所述裂殖壶菌是以裂殖壶菌HX‑308为野生型,且过表达裂殖壶菌C18延长酶基因和裂殖壶菌n3去饱和酶基因的裂殖壶菌工程菌。

3.根据权利要求2所述的裂殖壶菌发酵生产EPA和DHA的方法,其特征在于,所述裂殖壶菌工程菌是将克隆所得的裂殖壶菌HX‑308的C18延长酶基因和裂殖壶菌HX‑308的n3去饱和酶基因连接入pBS‑Zeo载体后,转化至裂殖壶菌HX‑308所得。

4.根据权利要求1所述的裂殖壶菌发酵生产EPA和DHA的方法,其特征在于,所述裂殖壶菌为以裂殖壶菌HX‑308为野生型,且过表达裂殖壶菌n3去饱和酶基因和突变后的裂殖壶菌C18延长酶基因的裂殖壶菌工程菌;

所述突变后的裂殖壶菌C18延长酶基因的突变位点包括:第43位氨基酸由笨丙氨酸突变为丝氨酸,第103位氨基酸由天冬氨酸突变为丙氨酸,第122位氨基酸由赖氨酸突变为谷氨酸,第150位氨基酸由苏氨酸突变为蛋氨酸,第201位氨基酸由酪氨酸突变为组氨酸且第

229位氨基酸由半胱氨酸突变为精氨酸;

所述n3去饱和酶基因的基因序列如SEQ NO.3所示。

5.根据权利要求1 4中任一项所述的裂殖壶菌发酵生产EPA和DHA的方法,其特征在于,~所述发酵生产后经脂质提取得EPA和DHA。

6.根据权利要求1 4中任一项所述的裂殖壶菌发酵生产EPA和DHA的方法,其特征在于,~在发酵生产0 36h时,向发酵培养基中添加恩西地平。

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7.根据权利要求6所述的裂殖壶菌发酵生产EPA和DHA的方法,其特征在于,所述发酵生产的温度为25 29℃,转速为150 200rpm,发酵总时间为48 130h。

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