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专利号: 2024100557790
申请人: 西南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种快速鉴别长吻鮠性别的长雄性缺失片段Indel标记,其特征在于:所述标记核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其中雌性个体具有SEQ ID NO.1序列,雄性个体缺失SEQ ID NO.1序列。

2.一种快速鉴别长吻鮠性别的长雄性缺失片段Indel标记的扩增引物,其特征在于:所述扩增引物序列的前引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,后引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

3.一种快速鉴别长吻鮠性别的长雄性缺失片段Indel标记鉴定长吻鮠性别的方法,其特征在于:具体方法如下:(1)提取待测长吻鮠的基因组DNA;

(2)利用序列为SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的引物对,将步骤(1)获取的DNA进行

2+

PCR扩增,以获得扩增产物;PCR反应体系为 Mg free 的10 x Buffer 1 μL,25 mM MgCl2 1μL,10 mM each的dNTP Mix 1.6μL,10 mM的正向、反向引物各1μL,浓度>30ng/μL的模板 DNA 1μL, 5U/μL的Taq 酶0.2 μL,ddH2O 13.2μL;

PCR反应程序为:95℃预变性5 min;95℃ 30 s, 55 ℃ 30 s, 72 ℃ 45 s,循环30次; 

72 ℃ 10 min;

(3)对步骤(2)获得的PCR扩增产物进行1.5%琼脂糖凝胶电泳,仅存在469 bp特异性片段的个体为雌性长吻鮠,有469 bp 和391 bp两条片段的个体具有SEQ ID NO.1序列的缺失,为雄性长吻鮠。

4.如权利要求1或2所述一种快速鉴别长吻鮠性别的长雄性缺失片段Indel标记及扩增引物在鉴定长吻鮠性别中的应用。