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专利号: 2021113610246
申请人: 西南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种唑螨酯抗原,其特征在于:结构通式如式A1或A2所示,所述式A1、A2中,X为芳香环、芳香杂环化合物中的一种,n为0‑6的整数,a为1‑6的整数,b为0‑6的整数;Protein表示载体蛋白,所述载体蛋白选自牛血清蛋白、卵清蛋白和血蓝蛋白中至少一种。

2.根据权利要求1所述的一种唑螨酯抗原的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将式B所示的1,3‑二甲基‑5苯氧基‑1H‑吡唑‑4‑甲醛肟与式C1或C2所示含有酯基的化合物进行反应得到含有羧基的式D1或D2所示化合物;

Y‑(CH2)n‑COO‑(CH2)m‑CH3式C1结构式

Y‑(CH2)a‑X‑(CH2)b‑COO‑(CH2)m‑CH3式C2结构式

所述式C1、C2和式D1、D2中,X为芳香环、芳香杂环化合物中的一种,Y为Cl、Br和I基团中的一种,n为0‑6的整数,m为0‑6的整数,a为1‑6的整数,b为0‑6的整数;

(2)式D1或D2所示化合物和N‑羟基琥珀酰亚胺在二环己基碳二亚胺或1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐存在的条件下进行偶联反应得到式E1/E2所示化合物;

所述式E1、E2中,X为芳香环、芳香杂环化合物中的一种,n为0‑6的整数,a为1‑6的整数,b为0‑6的整数;

(3)式E1或E2所示化合物与载体蛋白经偶联反应即得式A1或A2所示唑螨酯抗原;所述载体蛋白选自牛血清蛋白、卵清蛋白和血蓝蛋白中至少一种。

3.根据权利要求2所述的一种唑螨酯抗原的制备方法,其特征在于:所述步骤1中,式C1所示化合物选自氯甲酸甲酯、氯甲酸乙酯、氯乙酸乙酯、氯乙酸丁酯、氯丙酸甲酯、氯丁酸甲酯、氯丁酸乙酯、氯丁酸丙酯、溴乙酸甲酯、溴乙酸乙酯、溴乙酸丁酯、溴丁酸甲酯、溴丁酸乙酯、溴丁酸丁酯、碘乙酸乙酯、碘丁酸甲酯、碘丁酸乙酯中至少一种;

式C2所示化合物选自对氯苯甲酸甲酯、对氯苯乙酸乙酯、邻氯苯乙酸乙酯、间氯苯乙酸乙酯、对溴苯乙酸甲酯、对溴苯乙酸乙酯、对溴苯丙酸乙酯、对溴甲基苯甲酸甲酯、对溴甲基苯甲酸乙酯、间溴甲基苯甲酸甲酯、间溴苯甲酸甲酯、间溴苯甲酸乙酯、对碘苯甲酸甲酯、对碘苯甲酸乙酯、对碘苯乙酸乙酯、邻碘苯甲酸甲酯中至少一种。

4.根据权利要求2所述的一种唑螨酯抗原的制备方法,其特征在于:所述步骤1中,式C1或C2化合物和式B化合物的投料摩尔配比为0.1‑10:1;

反应的温度为0~100℃,时间为6~48小时;

反应的溶剂选自吡啶、N,N‑二甲基甲酰胺、二甲亚砜和四氢呋喃中至少一种。

5.根据权利要求2所述的一种唑螨酯抗原的制备方法,其特征在于:所述步骤2中,式D1或D2所示化合物、N‑羟基琥珀酰亚胺与二环己基碳二亚胺的摩尔份数比为1:1~5:1~5;

式D1或D2所示化合物、N‑羟基琥珀酰亚胺与1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的摩尔份数比为1:1~5:1~5;

所述偶联反应的温度为0~50℃,时间为4~24小时。

6.根据权利要求2所述的一种唑螨酯抗原的制备方法,其特征在于:所述步骤3中,式E1或E2所示化合物与所述载体蛋白的摩尔份数比为5~30:1;

所述偶联反应的温度为0~50℃,时间为8~36小时;所述偶联反应在pH值为5~9的条件下进行;

式E1或E2所示化合物在所述载体蛋白的溶液中进行偶联反应,所述载体蛋白的溶液是由所述载体蛋白加入至缓冲溶液中得到的,所述缓冲溶液选自碳酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液和4‑羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液中至少一种,所述缓冲液的pH值均为7.4。

7.根据权利要求2所述的一种唑螨酯抗原的制备方法,其特征在于:步骤3之后,所述方法还包括将所述偶联反应的反应体系进行透析的步骤;所述透析步骤中,所用透析液为pH值为4~10、浓度为0.01~0.2mol/L的磷酸盐缓冲溶液。

8.根据权利要求2所述的一种唑螨酯抗原的制备方法,其特征在于:所述唑螨酯抗原是式E1或E2化合物与载体蛋白通过酰胺键连接形成的偶联物;所述酰胺键是式D1或D2上的羧基通过活泼酯与载体蛋白上的氨基形成的。

9.根据权利要求1所述的唑螨酯抗原的应用,其特征在于,用于制备检测样品中唑螨酯的酶联免疫试剂盒、唑螨酯的发光免疫试剂盒或免疫亲和色谱柱。