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专利号: 2018105704413
申请人: 西南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种螺虫乙酯抗原,其特征在于,结构通式如式A所示,

所述式A中,X为CH2、CO基团中的一种,n为0-6的整数;Protein表示载体蛋白,所述载体蛋白选自牛血清蛋白、卵清蛋白和血蓝蛋白中至少一种。

2.根据权利要求1所述的一种螺虫乙酯抗原的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1,将螺虫乙酯水解得到式B所示化合物;

步骤2,将式B化合物与式C所示同时含有氨基和羧基的化合物进行反应得到式D所示化合物;

Y-X-(CH2)n-COOH

式C结构式

所述式C和式D中,X为CH2、CO基团中的一种,Y为Cl、Br和I基团中的一种,n为0-6的整数;

步骤3,式D所示化合物和N-羟基琥珀酰亚胺在二环己基碳二亚胺或1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐存在的条件下进行偶联反应得到式E所示化合物;

所述式E中,X为CH2、CO基团中的一种,n为0-6的整数;

步骤4,式E所示化合物与载体蛋白经偶联反应即得式A所示螺虫乙酯抗原;所述载体蛋白选自牛血清蛋白、卵清蛋白和血蓝蛋白中至少一种。

3.根据权利要求2所述的一种螺虫乙酯抗原的制备方法,其特征在于,步骤2中,式C所示化合物选自氯乙酸、溴乙酸、碘乙酸、氯丙酸、溴丙酸、碘丙酸、氯丁酸、溴丁酸、碘丁酸中至少一种。

4.根据权利要求2所述的一种螺虫乙酯抗原的制备方法,其特征在于,所述步骤2中,式B化合物式和C化合物的投料摩尔配比为0.1-10:1;反应的温度为0~100℃,时间为3~48小时;反应的溶剂选自吡啶、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜和四氢呋喃中至少一种。

5.根据权利要求2所述的一种螺虫乙酯抗原的制备方法,其特征在于,所述步骤3中,式D所示化合物、N-羟基琥珀酰亚胺与二环己基碳二亚胺的摩尔份数比为1:1~5:1~5;

式D所示化合物、N-羟基琥珀酰亚胺与1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的摩尔份数比为1:1~5:1~5;

所述偶联反应的温度为0~50℃,时间为4~24小时。

6.根据权利要求2所述的一种螺虫乙酯抗原的制备方法,其特征在于,步骤4中,式E所示化合物与所述载体蛋白的摩尔份数比为5~30:1;

所述偶联反应的温度为0~50℃,时间为4~36小时;所述偶联反应在pH值为5~9的条件下进行;

式E所示化合物在所述载体蛋白的溶液中进行偶联反应,所述载体蛋白的溶液是由所述载体蛋白加入至缓冲溶液中得到的,所述缓冲溶液选自碳酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液和4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液中至少一种,所述缓冲液的pH值均为7.4。

7.根据权利要求2所述的一种螺虫乙酯抗原的制备方法,其特征在于,还包括将所述偶联反应的反应体系进行透析;所述透析步骤中,所用透析液为pH值为4~10、浓度为0.01~

0.2mol/L的磷酸盐缓冲溶液。

8.根据权利要求2所述的一种螺虫乙酯抗原的应用,其特征在于,用于制备检测样品中螺虫乙酯的酶联免疫试剂盒、螺虫乙酯的发光免疫试剂盒或免疫亲和色谱柱中的应用。