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专利号: 2020112638432
申请人: 济南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种检测啶虫脒的电化学传感器,其特征在于,包括检测电极,Nb. BbvCI酶,Klenow聚合酶,血红素,序列如SEQ ID NO: 1-4所示的T1链、T2链、P1链、P2链;所述检测电极为表面修饰DT链、DW链和LP链的金电极,所述DT链、DW链和LP链序列如SEQ ID NO: 5-7所示,所述DT链的3’端和所述DW链的5’端修饰巯基。

2.一种利用如权利要求1所述的电化学传感器检测啶虫脒的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将DT链修饰到金电极表面;

(2)将DW链和LP链在缓冲溶液中杂交获得DW-LP链,然后将DW-LP链修饰到步骤(1)获得的金电极表面,获得DNA修饰金电极;

(3)T1链和T2链在缓冲溶液杂交获得T1-T2杂交链,将P1链、P2链和啶虫脒的待测液或系列浓度标准溶液混合,于Nt. BbvCl酶和Klenow酶催化下,在含dNTP的溶液中反应,获得反应液;

(4)DNA修饰金电极表面滴加反应液与Nt. BbvCl酶反应,冲洗后再滴加血红素孵育;然后以双氧水为底物,以Ag/AgCl电极为参比电极、Pt电极为对电极,采用差分脉冲伏安法检测信号;

(5)以系列浓度标准溶液中啶虫脒浓度对数对电流大小作标准曲线,根据待测液电流大小计算待测液中啶虫脒浓度。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤(1)中修饰前还包括金电极预处理步骤:在0.3和0.05 µM氧化铝液浆中依次抛光,然后冲洗。

4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤(2)和步骤(3)中,杂交温度为37 ℃,杂交时间为30 min。

5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述缓冲溶液为pH 7.4的PBS缓冲液;优选为含有1 mM MgCl2和1 mM CaCl2的PBS缓冲液。

6.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤(4)中,差分脉冲伏安法参数设置为:电位0到-0.5 V,脉冲宽度0.05 V,扫描速率为0.06 s。