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专利号: 2020102736091
申请人: 济南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种检测啶虫脒的化学发光生物传感器,其特征在于,包括:金纳米颗粒、HAP链、Walker链、Lock链、目标物;

所述的HAP链的碱基序列如SEQ No.1所示;具体为:5’‑SH‑TGGG TAGGG CGGG TTGGG CAC TAT rA GGA AGA GA AAAACCCG‑3’;

所述的Lock链的碱基序列如SEQ No.2所示;具体为:5’‑AA GAG A CTGA CAC CAT ATT ATG AAG A‑3’;

所述的Walker链的碱基序列如SEQ No.3所示;具体为:5’‑SH‑(T)35TCTTCATAAATTA GTCAGTCTCTTCTCCGAGCCGGTCGAAATAGT‑3’;

所述的HAP链5’连接有‑SH;所述的Walker链5’连接有‑SH;所述的HAP链5’的第25位碱基序列连接有核糖核酸RNA腺嘌呤rA。

2.一种权利要求1所述的生物传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)金纳米颗粒的制备;

(2)将Walker链和HAP链修饰到金纳米颗粒表面;

(3)标记好的纳米金颗粒的均相反应;

(4)化学发光检测。

3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(1)金纳米颗粒的制备:采用柠檬酸三钠还原法制备。

4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(2)将HAP和Walker链修饰到金纳米颗粒表面:①首先将Walker链和Lock链混合反应,形成锁住的Walker链;

②将步骤①锁住的Walker链和HAP链混合,作为底物探针;

③向纳米金颗粒溶液中加入底物探针,4 ℃下放置;

④分多次缓慢加入PB缓冲液,搅拌,放到王水中,4 ℃放置;

⑤48 h后分多次缓慢加入PBS缓冲液,4 ℃下放置;

⑥24 h后,加入灭菌水,离心除去上层清液,再离心除去上层清液。

5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(3)标好的纳米金颗粒的+ 2+均相反应:将纳米金颗粒溶液、灭菌水、目标物、K 、Mn 、缓冲液、血红素以及鲁米诺和过氧化氢加入到灭菌的离心管中并震荡,然后在37℃水浴锅中孵育2 h。

6.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(4)化学发光检测:用荧光仪检测鲁米诺的化学发光信号,荧光仪激发波长设置为350 nm,发射波长设置为420 nm,检测范围设置350 nm‑550 nm,读取荧光信号变化,检测待测目标物。

7.采用权利要求2所述的制备方法制备的化学发光传感器在检测啶虫脒上的应用。