利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2020112637548
申请人: 济南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种用于氨苄青霉素检测的电化学适配体传感器,其特征在于,包括检测电极,血红素,序列如SEQ ID NO: 3‑6所示的H3链、H4链、适配体Apt、T链;所述检测电极为表面修饰H1链和H2链的金电极,所述H1链和H2链序列如SEQ ID NO: 1‑2所示,所述H1链的5’端和所述H2链的3’端修饰巯基。

2.根据权利要求1所述的电化学适配体传感器,其特征在于,所述H1链与H2链的摩尔比为1:1‑15;所述H3链与H4链的摩尔比为1:1‑15;所述H1链与所述H3链的摩尔比为1:1。

3.一种利用如权利要求1或2所述的电化学适配体传感器检测氨苄青霉素的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将H1链和H2链依次修饰到金电极表面,获得H1‑H2修饰金电极;

(2)适配体Apt和T链在缓冲溶液杂交获得Apt‑T杂交链;

(3)将Apt‑T杂交链、氨苄青霉素的待测液或系列浓度标准溶液混合,再加入含H3链和H4链的溶液孵育,获得反应液;

(4)H1‑H2修饰金电极表面滴加反应液反应,冲洗后再滴加血红素孵育;然后以双氧水为底物,以Ag/AgCl电极为参比电极、Pt电极为对电极,采用差分脉冲伏安法检测信号;

(5)以系列浓度标准溶液中氨苄青霉素浓度对数对电流大小作标准曲线,根据待测液电流大小计算待测液中氨苄青霉素浓度。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(1)中修饰前还包括金电极预处理步骤:在0.3和0.05μm氧化铝液浆中依次抛光,然后冲洗。

5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,修饰步骤为将含H1链或H2链的溶液滴加到电极表面,在37℃下反应30 min后冲洗。

6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,杂交步骤为将含适配体Apt和T链的溶液在95℃下变性5 min,然后自然冷至室温。

7.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述缓冲溶液为pH 7.4的PBS缓冲液;为含有1mM MgCl2和1mM CaCl2的PBS缓冲液。

8.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(4)中,反应的温度为37 ℃,反应时间为60min。

9.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(4)中,差分脉冲伏安法参数设置为:电位0到‑0.5V,脉冲宽度0.05V,扫描速率为0.06s。