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专利号: 2020107070405
申请人: 烟台大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种用于扩增与小麦抗白粉病基因PmDGM紧密连锁的分子标记的引物,其特征在于,所述分子标记为HENU099;所述分子标记HENU099的上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;所述分子标记HENU099的下游引物核苷酸序列如SEQ ID N:2所示;以所述分子标记HENU099的引物对待测小麦基因组DNA进行PCR扩增,获得对应的扩增产物分子量为750bp。

2.一种检测待测品种中是否携带小麦抗白粉病基因PmDGM的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)从待测小麦样品的新鲜叶片提取基因组DNA;

(2)利用权利要求1所述的用于扩增与小麦抗白粉病基因PmDGM紧密连锁的分子标记的引物对所述小麦基因组DNA进行PCR扩增,获得扩增产物;

(3)对扩增产物进行电泳、检测,若能扩增出750bp的特异条带,说明待测小麦中存在抗白粉病基因PmDGM。

3.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于,所述PCR扩增的体系为15μL,包含

50ng/μL小麦基因组DNA 1.0μL,PCR MasterMix 7.5μL,5μM上游引物0.6μL,5μM下游引物

0.6μL,无菌去离子水5.3μL。

4.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,所述PCR扩增的程序为:94℃预变性3分钟;94℃变性15秒,55℃退火20秒,延伸40秒,30个循环;72℃延伸10分钟;4℃保存。