1.一种构建自组装表达双酶菌株的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)以嗜酸热硫化叶菌Sulfolobus acidocaldarius ATCC 33909基因组为模板，PCR扩增得到MTSase的编码基因treY和MTHase的编码基因treZ，所述基因treY的基因序列为SEQ ID NO.1，所述基因treZ的基因序列为SEQ ID NO.2；以合成的SpyCatcher基因序列为模板，PCR扩增得到SpyCatcher基因，所述SpyCatcher基因序列为SEQ ID NO.3；将SpyTag基因序列直接合成在引物中，所述SpyTag基因序列为SEQ ID NO.4；

(2)将pET28a质粒用限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ进行双酶切；将pETDuet质粒用限制性内切酶BamHⅠ和NotⅠ进行双酶切；

(3)利用无缝克隆技术将步骤(1)、(2)中得到的treY基因、SpyCatcher基因和双酶切的pET28a质粒连接，得到重组表达质粒pET28a-SpyCatcher-treY；将SpyTag、treZ基因和双酶切的pETDuet质粒连接，得到重组表达质粒pETDuet-SpyTag-treZ；并将得到的重组表达质粒共同转化到大肠杆菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞中得到重组目的表达菌种，即E.coli BL21(DE3)/pET28a-SpyCatcher-treY/pETDuet-SpyTag-treZ；

或者利用无缝克隆技术将SpyCatcher基因分别连接到treY基因的C端和N端，然后和双酶切的pET28a质粒连接，得到重组表达质粒pET28a-SpyCatcher-treY-SpyCatcher；将SpyTag、treZ基因和双酶切的pETDuet质粒连接，得到重组表达质粒pETDuet-SpyTag-treZ；

并将得到的重组表达质粒共同转化到大肠杆菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞中得到重组目的表达菌种，即E.coli BL21(DE3)/pET28a-SpyCatcher-treY-SpyCatcher/pETDuet-SpyTag-treZ；

或者利用无缝克隆技术将SpyCatcher基因和SpyTag基因分别连接到treY基因的C端和N端，然后和双酶切的pET28a质粒连接，得到重组表达质粒pET28a-SpyCatcher-treY-SpyTag；将SpyCatcher基因和SpyTag基因分别连接到treZ基因的C端和N端，然后和双酶切的pETDuet质粒连接，得到重组表达质粒pETDuet-SpyTag-treZ-SpyCatcher；并将得到的重组表达质粒共同转化到大肠杆菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞中得到重组目的表达菌种，即E.coli BL21(DE3)/pET28a-SpyCatcher-treY-SpyTag/pETDuet-SpyTag-treZ-SpyCatcher。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中PCR扩增程序如下：

95℃预变形3min；95℃变性15s，60℃退火15s，72℃延伸30个循环；72℃延伸5min。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(1)中PCR扩增体系如下：

2× Max Master Mix 25μL，上游引物2.5μL，下游引物2.5μL，基因模板2.5μL，ddH2O 17.5μL。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中质粒酶切体系如下：

pET28a质粒17μL，ddH2O 3.5μL，10×QuickCut Buffer 2.5μL，BamH I 1μL，XhoⅠ 1μL；

反应条件:37℃金属浴中反应2h；

pETDuet质粒17μL，ddH2O 3.5μL，10×QuickCut Buffer 2.5μL，BamH I 1μL，NotⅠ 1μL；

反应条件：37℃金属浴中反应2h。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中treY基因的扩增引物序列为SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8；

步骤(1)中treZ基因的扩增引物序列为SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.11；

步骤(1)中SpyCatcher基因的扩增引物序列为SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.16。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(3)中将以嗜酸热硫化叶菌为模板，用引物SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6PCR扩增得到的treY基因、以合成的SpyCatcher基因为模板，用引物SEQ ID NO.12和SEQ ID NO.14PCR扩增得到的SpyCatcher基因和双酶切的pET28a质粒，利用多片段无缝克隆试剂盒，37℃金属浴连接30min，得到重组表达质粒pET28a-SpyCatcher-treY；

同理，将以嗜酸热硫化叶菌为模板，用引物SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.7PCR扩增得到的treY基因；以合成的SpyCatcher基因为模板，用引物SEQ ID NO.12和SEQ ID NO.14PCR扩增得到的SpyCatcher基因；以合成的SpyCatcher基因为模板，用引物SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14PCR扩增得到的SpyCatcher基因和双酶切的pET28a质粒，利用多片段无缝克隆试剂盒，37℃金属浴连接30min，得到重组表达质粒pET28a-SpyCatcher-treY-SpyCatcher；

将以嗜酸热硫化叶菌为模板，用引物SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.8PCR扩增得到的treY-SpyTag基因、以合成的SpyCatcher基因为模板，用引物SEQ ID NO.12和SEQ ID NO.14PCR得到的SpyCatcher基因和双酶切的pET28a质粒，利用多片段无缝克隆试剂盒，37℃金属浴连接30min，得到重组表达质粒pET28a-SpyCatcher-treY-SpyTag；

将以嗜酸热硫化叶菌为模板，用引物SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.11PCR扩增得到的SpyTag-treZ基因、以合成的SpyCatcher基因为模板，用引物SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.16PCR扩增得到的SpyCatcher基因和双酶切的pETDuet质粒，利用多片段无缝克隆试剂盒，37℃金属浴连接30min，得到重组表达质粒pETDuet-SpyTag-treZ-SpyCatcher；

将以嗜酸热硫化叶菌为模板，用引物SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10PCR扩增得到的SpyTag-treZ基因和双酶切的pETDuet质粒，利用单片段无缝克隆试剂盒，37℃金属浴连接

30min，得到重组表达质粒pETDuet-SpyTag-treZ。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中得到的重组表达质粒pET28a-SpyCatcher-treY和pETDuet-SpyTag-treZ用化学转化法同时转化到大肠杆菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞中；将重组表达质粒pET28a-SpyCatcher-treY-SpyCatcher和pETDuet-SpyTag-treZ用化学转化法同时转化到大肠杆菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞中；将重组表达质粒pET28a-SpyCatcher-treY-SpyTag和pETDuet-SpyTag-treZ-SpyCatcher用化学转化法同时转化到大肠杆菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞中；筛选重组目的表达菌株，将上述转化子37℃200r/min培养1h，随后将转化细胞涂布在含有80μg/mL卡那霉素的LB平板上，

37℃恒温过夜培养，挑取单菌落接种至含有80μg/mL卡那霉素的LB液体培养基中，待菌液浑浊后通过菌落PCR验证，得到目的基因条带的阳性克隆子，然后送去上海生工生物科技有限公司测序，保留测序结果正确的菌株作为目的表达菌株。

8.权利要求1构建的目的表达菌株E.coli BL21(DE3)/pET28a-SpyCatcher-treY/pETDuet-SpyTag-treZ、E.coli BL21(DE3)/pET28a-SpyCatcher-treY-SpyCatcher/pETDuet-SpyTag-treZ、E.coli BL21(DE3)/pET28a-SpyCatcher-treY-SpyTag/pETDuet-SpyTag-treZ-SpyCatcher之一或二者以上在发酵生产MTSase-MTHase多酶复合体中的应用。

9.权利要求1构建的目的表达菌株E.coli BL21(DE3)/pET28a-SpyCatcher-treY/pETDuet-SpyTag-treZ、E.coli BL21(DE3)/pET28a-SpyCatcher-treY-SpyCatcher/pETDuet-SpyTag-treZ、E.coli BL21(DE3)/pET28a-SpyCatcher-treY-SpyTag/pETDuet-SpyTag-treZ-SpyCatcher之一或二者以上在发酵生产海藻糖中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，包括如下步骤：

将目的表达菌种接种于含有80μg/mL卡那霉素的LB液体培养基中，37℃、200rpm培养

12h作为种子液；将种子液以体积比1:100的比例接种至含有80μg/mL卡那霉素的TB液体培养基中，37℃、200rpm培养8h，然后添加终浓度为6mg/L的乳糖作为诱导剂，将温度调至25℃继续发酵12h，发酵结束后，收集菌体，进行破壁制得粗酶液，然后在65℃、pH5.5条件下转化质量浓度为15％的麦芽糊精，并添加质量浓度为5％的环糊精葡萄糖基转移酶，转化生产海藻糖。