1.一种编码谷氨酸脱羧酶的基因,其特征在于,所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一种重组载体,其特征在于,所述重组载体包括如权利要求1所述的基因。
3.一种重组工程菌,其特征在于,所述重组工程菌包括如权利要求1所述的基因或如权利要求2所述的重组载体。
4.根据权利要求3所述的重组工程菌,其特征在于,所述重组工程菌通过将所述重组载体热激转化至大肠杆菌BL21感受态细胞制备得到,所述重组载体通过将所述基因连接至pET28a质粒制备得到。
5.一种谷氨酸脱羧酶,其特征在于,所述谷氨酸脱羧酶由如权利要求3或4的重组工程菌表达得到,所述谷氨酸脱羧酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
6.一种γ-氨基丁酸的生物合成方法,其特征在于,将L-谷氨酸或L-谷氨酸钠加入到含有如权利要求3或4所述的重组工程菌的发酵液中,使L-谷氨酸或L-谷氨酸钠的终浓度为1~8g/L,维持反应温度为4~50℃,反应2~48h即可制得γ-氨基丁酸。
7.根据权利要求6所述的γ-氨基丁酸的生物合成方法,其特征在于,所述重组工程菌的发酵液按照下述方法制备得到:(1)将如权利要求3所述的重组工程菌单菌落接种于含有
50μg/mL卡拉霉素的LB液体培养基中,在37℃、220rpm下培养过夜;(2)将步骤(1)所得过夜培养的产物按2%的接种量接种到LB液体培养基中,并置于37℃下、200rpm培养2.5h;(3)加入IPTG诱导,使IPTG的终浓度为0.1mmol/L,置于16℃下、220rpm培养20h,得到重组工程菌发酵液。
8.根据权利要求6或7所述的γ-氨基丁酸的生物合成方法,其特征在于,反应过程中用HPLC法检测γ-氨基丁酸的生成量,待转化率达到90%以上时,终止反应;反应液经离心分离上清,再经过0.22μm的滤器过滤后,将过滤后的上清使用旋转蒸发仪60℃蒸发去水至溶液成粘稠状;向所述粘稠状溶液中加入3倍体积的无水乙醇,搅拌,室温下自然降温;降至室温后将其放置4℃环境中过夜结晶,抽滤,即得γ-氨基丁酸晶体。