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专利号: 2021102918569
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-03-02
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.meso‑2,6‑二氨基庚二酸脱氢酶CgDAPDH突变体,其特征在于,将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的meso‑2,6‑二氨基庚二酸脱氢酶CgDAPDH的第120位、第144位、第169位和第

223位中的一个或多个氨基酸进行突变。

2.根据权利要求1所述的突变体,其特征在于,所述突变体为(a)~(g)任一:(a)将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的meso‑2,6‑二氨基庚二酸脱氢酶CgDAPDH的第

120位天冬氨酸突变为丝氨酸;

(b)将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的meso‑2,6‑二氨基庚二酸脱氢酶CgDAPDH的第

169位异亮氨酸突变为脯氨酸;

(c)将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的meso‑2,6‑二氨基庚二酸脱氢酶CgDAPDH的第

223位酪氨酸突变为半胱氨酸;

(d)将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的meso‑2,6‑二氨基庚二酸脱氢酶CgDAPDH的第

120位天冬氨酸突变为丝氨酸,并将第169位异亮氨酸突变为脯氨酸;

(e)将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的meso‑2,6‑二氨基庚二酸脱氢酶CgDAPDH的第

144位色氨酸突变为丝氨酸,并将第169位异亮氨酸突变为脯氨酸;

(f)将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的meso‑2,6‑二氨基庚二酸脱氢酶CgDAPDH的第

169位异亮氨酸突变为脯氨酸,并将第223位酪氨酸突变为半胱氨酸;

(g)将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的meso‑2,6‑二氨基庚二酸脱氢酶CgDAPDH的第

120位色氨酸突变为丝氨酸,并第144位色氨酸突变为丝氨酸,并将第169位异亮氨酸突变为脯氨酸。

3.编码权利要求1或2所述meso‑2,6‑二氨基庚二酸脱氢酶CgDAPDH突变体的基因。

4.携带权利要求3所述基因的载体。

5.根据权利要求4所述的载体,其特征在于,携带权利要求4所述突变体基因CgDAPDH和PaMDH基因;所述PaMDH基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示。

6.表达权利要求1或2所述meso‑2,6‑二氨基庚二酸脱氢酶CgDAPDH突变体,或表达权利要求3所述基因,或含有权利要求4或5所述载体的微生物细胞。

7.一种微生物细胞,其特征在于,含有双质粒表达系统;所述双质粒表达系统由权利要求5所述的载体和携带PmL‑AAD、SambHmaS基因的重组载体组成。

8.根据权利要求7所述的微生物细胞,其特征在于,以大肠杆菌为宿主,含有携带权利要求4所述突变体基因CgDAPDH和PaMDH基因的质粒pRSFDuet‑1,和携带PmL‑AAD、SambHmaS基因的质粒pETDuet‑1。

9.一种D‑对羟基苯甘氨酸的制备方法,其特征在于,以权利要求7或8所述的微生物细胞为催化剂,催化L‑酪氨酸生产D‑对羟基苯甘氨酸。

10.权利要求1~2任一所述的meso‑2,6‑二氨基庚二酸脱氢酶CgDAPDH突变体,或权利要求3所述的基因,或权利要求4~5任一所述重组载体,或权利要求6~8任一所述的微生物细胞,或权利要求9所述方法在制备含D‑对羟基苯甘氨酸的产品,或以D‑对羟基苯甘氨酸为原料的产品中的应用。