1.一种D-阿洛酮糖3-差向异构酶突变体,由SEQ ID NO.5所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第242位、(2)第105位、(3)第210位、(4)第147位、(5)第184位。
2.如权利要求1所述的突变体,其特征在于所述点突变为下列中的一个或多个:(1)第
242位缬氨酸突变为赖氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苏氨酸或天冬酰胺;(2)第105位甘氨酸突变为天冬酰胺、天冬氨酸或谷氨酸;(3)第210位异亮氨酸突变为苏氨酸、苯丙氨酸、谷氨酰胺或丝氨酸;(4)第147位亮氨酸突变为赖氨酸、天冬酰胺、精氨酸或半胱氨酸;(5)第184位苏氨酸突变为酪氨酸或苯丙氨酸。
3.如权利要求1所述的突变体,其特征在于所述突变体氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示。
4.权利要求1~3之一所述的突变体在微生物催化D-果糖异构化制备D-阿洛酮糖中的应用。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述催化在60~85℃下进行。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述应用为:以含D-阿洛酮糖3-差向异构酶突变体基因的工程菌经发酵培养获得的湿菌体为酶源,以D-果糖为底物,以钴盐为助剂,以Na2HPO4/NaH2PO4缓冲液为反应介质,在65~85℃,100~300r/min条件下反应,制得D-阿洛酮糖。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于:所述反应体系中,底物初始浓度为300~
700g/L,湿菌体的用量为10~50g/L,钴盐初始浓度为0.5~5mM。