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专利号: 2019110303304
申请人: 江苏农林职业技术学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种抗氧化蝉花菌丝体的发酵方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)培养基制备:制备PDA斜面培养基、种子培养液与发酵培养基;

(2)菌种活化:将蝉拟青霉母种无菌操作分割,接种至步骤(1)中所述PDA斜面培养基上活化培养得到活化菌种;

(3)摇瓶种子液制备:将步骤(2)中所述活化菌种接种到步骤(1)中所述种子培养液中,得到一级种;将所述一级种接种到步骤(1)所述种子培养液中,按照培养所述活化菌种的方法培养所述一级种,得到二级种;

(4)发酵罐种子液制备:将步骤(3)中所述一级种或二级种接种到步骤(1)中所述种子培养液中进行培养,得发酵罐种子液;

(5)发酵罐培养:将步骤(4)中所述发酵罐种子液接种于步骤(1)所述发酵培养基中,进行发酵培养,得蝉花发酵液;

(6)静置培养:将步骤(5)中所述蝉花发酵液放出,进行半固体发酵培养,即得到抗氧化蝉花菌丝体的发酵物;

发酵培养基接种后,在25℃、150r/min条件下振荡培养5天后,添加1%碳酸钙调节pH至

7,28℃静置培养8天;

所述步骤(3)所述得到一级种为每个培养瓶接种3‑8块黄豆粒大小活化菌种,于22‑28℃,摇床转速120‑210 r/min振荡培养2‑3 天,得一级种;

所述步骤(3)所述得到二级种为按照培养基总体积的5‑10 %接种,于22‑28℃,摇床转速120‑210 r/min振荡培养1‑2天,得二级种;

所述步骤(4)所述接种为按照培养基总体积的5‑10 %将一级种或二级种接种到所述种子培养液中,于22‑28℃,摇床转速120‑210 r/min,通气量0.5‑1V/(V·min),培养1天后,得发酵罐种子液;

所述步骤(5)中所述将发酵罐种子液接种于步骤(1)所述发酵培养基中,接种的量为按发酵培养基的10%体积分数接种于发酵培养基;

所述步骤(5)所述发酵培养条件为:接种发酵温度为22‑28℃,转速120‑210 r/min,通气量0.5‑1.2 V/(V·min),1‑5 天后,添加1%碳酸钙调节pH至6‑7;

所述步骤(6)所述半固体发酵培养为:将发酵液放入无菌的培养盘中,22‑28℃静置培养5‑20d;

步骤(1)所述PDA斜面培养基,包含以下质量分数的原料:马铃薯20%,葡萄糖2%,琼脂粉

1.5‑2%,溶剂为水,121℃灭菌30min;所述种子培养液,包含以下质量分数原料:蔗糖2%,可溶性淀粉3%,大豆粉2%,KH2PO4 0.1%,MgSO4·7H2O 0.05%,溶剂为水;瓶装液量为40%,121℃灭菌30min;种子罐投料量70%,121℃实罐灭菌30min;所述发酵培养基,包含以下质量分数原料:质量分数分别为葡萄糖4%、铁棍山药粉5%、蛋白胨4%、MgCl2·6H2O 0.1%,溶剂为水,发酵罐投料量50‑70%,121℃实罐灭菌30min。

2.根据权利要求1所述一种抗氧化蝉花菌丝体的发酵方法,其特征在于:所述步骤(6)进行半固体发酵培养后还包括灭除活性。

3.根据权利要求2所述一种抗氧化蝉花菌丝体的发酵方法,其特征在于:所述灭除活性为微波高火处理30‑60 s或121℃高压蒸汽处理5‑10 min。