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专利号: 2019104471251
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-03-02
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种用于合成亚精胺的重组细胞,其特征在于,表达了高丝氨酸脱氢酶、羧基亚精胺脱羧酶、羧基亚精胺脱氢酶;所述重组细胞以大肠杆菌为出发菌株构建得到重组大肠杆菌,所述重组大肠杆菌中含有(a)~(k)所述任一载体或载体组合:(a)将来源于BurkholderiacepaciaATCC 25416的高丝氨酸脱氢酶、来源于Porphyromonascatoniae ATCC 51270的羧基亚精胺脱氢酶依次连接至pETDuet‑1载体,并将来源于Bacteroides cellulosilyticusDSM 14838、Clostridium symbiosum ATCC 

14940、Campylobacter  jejunisubsp.jejuni  ATCC  700819或RhodobactersphaeroidesATCC BAA‑808的羧基亚精胺脱羧酶连接至pACYCDuet‑1载体;

(b)将来源于BurkholderiacepaciaATCC  25416的高丝氨酸脱氢酶、Porphyromonascatoniae ATCC 51270的羧基亚精胺脱氢酶和来源于Campylobacter jejunisubsp.jejuni ATCC 700819的羧基亚精胺脱羧酶依次连接至pETDuet‑1或pACYCDuet‑1载体;

(c)将来源于BurkholderiacepaciaATCC  25416的高丝氨酸脱氢酶、Porphyromonascatoniae ATCC 51270的羧基亚精胺脱氢酶依次连接至pACYCDuet‑1载体,并将来源于BurkholderiacepaciaATCC 25416的羧基亚精胺脱羧酶连接至pETDuet‑1载体;

(d)将来源于BurkholderiacepaciaATCC  25416的高丝氨酸脱氢酶、Porphyromonascatoniae  ATCC  51270的羧基亚精胺脱氢酶、来源于BurkholderiacepaciaATCC 25416的羧基亚精胺脱羧酶依次连接至pRSfDuet‑1;

(e)将来源于BurkholderiacepaciaATCC  25416的高丝氨酸脱氢酶、将来源于Campylobacter jejuni subsp.jejuni ATCC 700819的羧基亚精胺脱羧酶依次连接至pETDuet‑1载体,并将来源于Porphyromonascatoniae ATCC 51270的羧基亚精胺脱氢酶连接至pACYCDuet‑1载体;

(f)将来源于Campylobacter jejuni subsp.jejuni ATCC 700819的羧基亚精胺脱羧酶、来源于Porphyromonascatoniae ATCC 51270的羧基亚精胺脱氢酶依次连接至pETDuet‑

1载体,并将来源于BurkholderiacepaciaATCC 25416的高丝氨酸脱氢酶连接至pACYCDuet‑

1载体;

(g)将来源于Rhizobium leguminosarumATCC 14479的高丝氨酸脱氢酶、Clostridium symbiosum ATCC 14940的羧基亚精胺脱氢酶、来源于Campylobacter jejunisubsp.jejuni ATCC 700819的羧基亚精胺脱羧酶依次连接至pETDuet‑1;

(h)Enterococcus faecalis ATCC 29212的高丝氨酸脱氢酶、来源于Campylobacter jejuni subsp.jejuni ATCC 700819的羧基亚精胺脱氢酶、来源于Campylobacter jejunisubsp.jejuni ATCC 700819的羧基亚精胺脱羧酶依次连接至pETDuet‑1;

(i)Rhodobactersphaeroides ATCC BAA‑808的高丝氨酸脱氢酶、来源于Clostridium sp.DSM 8431的羧基亚精胺脱氢酶、来源于Campylobacter jejunisubsp.jejuni ATCC 

700819的羧基亚精胺脱羧酶依次连接至pETDuet‑1;

(j)Pseudomonas fluorescens NCIMB 11764的高丝氨酸脱氢酶、来源于Clostridium sp.DSM 8431的羧基亚精胺脱氢酶、来源于Bacteroides cellulosilyticusDSM 14838的羧基亚精胺脱羧酶依次连接至pETDuet‑1;

(k)Lactobacillus fermentum  ATCC  14931的高丝氨酸脱氢酶、来源于PrevotellabiviaDSM 20514的羧基亚精胺脱氢酶、来源于Clostridium symbiosum ATCC 

14940的羧基亚精胺脱羧酶依次连接至pRSFDuet‑1。

2.根据权利要求1所述的一种用于合成亚精胺的重组细胞,其特征在于,以大肠杆菌为宿主,所述大肠杆菌为Escherichia coli BL21(DE3)。

3.根据权利要求1所述的一种用于合成亚精胺的重组细胞,其特征在于,所述3种酶借助载体进行表达融合表达或共表达,或者整合到宿主的基因组上进行表达。

4.一种全细胞催化生产亚精胺的方法,其特征在于,以权利要求1~3任一所述重组细胞为全细胞催化剂,以腐胺、高丝氨酸为底物。

5.权利要求1~3任一所述的重组细胞在生产亚精胺或者含有亚精胺的产品或者以亚精胺为前体的物质中的应用。