1.一种氨基和多肽修饰的AIE聚合物纳米粒子的制备方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:(1)将乳化剂和氨基功能单体溶于去离子水中,得到水相溶液,其中乳化剂的质量用量为水质量用量的0.1%~10%;
所述乳化剂,选自下列至少一种:阴离子乳化剂、阳离子乳化剂、两性乳化剂和非离子乳化剂;
所述氨基功能单体为式(1)所示的氨基丙烯酸酯盐酸盐和氨基甲基丙烯酸酯盐酸盐以及式(2)所示的N-(氨烷基)丙烯酰胺盐酸盐和N-(氨烷基)甲基丙烯酰胺盐酸盐中的至少一种;
式(I)和式(II)中,R1、R3为H或甲基;R2、R4为C1~C5的烷基;
(2)将AIE分子、奥氏熟化效应抑制剂和油溶性引发剂溶于疏水单体中,得到油相溶液;
以步骤(1)使用的氨基功能单体和疏水单体的总质量为单体总质量,其中氨基功能单体的质量用量为单体总质量用量的0.1%~20%,AIE分子质量用量为单体总质量的0.1%~
30%,奥氏熟化效应抑制剂的质量用量为单体总质量的1%~12%,油溶性引发剂的质量用量为单体总质量0.05%~10%;所述单体总质量为步骤(1)中去离子水质量用量的1%~
50%;
所述的AIE分子选自下列AIE-1至AIE-42分子中的至少一种:
AIE-7分子,其中R5=H,R6=N(C2H5)2
所述奥氏熟化效应抑制剂选自下列至少一种:C14~C22的脂肪烃、C14~C22的脂肪醇;
所述油溶性引发剂选自下列至少一种:偶氮二异丁腈、偶氮二异庚腈、偶氮二异戊腈、偶氮二异丁酸二甲酯、过氧化二苯甲酰、过氧化叔戊酸叔丁酯、过氧化二碳酸二异丙酯、过氧化二月桂酰;
所述疏水单体选自下列至少一种:苯乙烯、式(III)所示的丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯;
式(III)中,R10为H或甲基;R11为C1~C5的烷基;
(3)将按步骤(1)所制的水相溶液加至步骤(2)所制的油相溶液中,经搅拌预乳化,得到粗乳液;将装有粗乳液的容器置于冰水浴中,在25W~950W的功率下超声处理0.5min~
60min,制得单体细乳液;通氮除氧,在40℃~90℃的温度下,在氮气保护下反应1h~48h,制得表面氨基修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液,透析得到纯化的氨基修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液;用碱性pH缓冲液将氨基修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液的pH值调节至7.0~8.0之间,并将乳液的固含量控制在0.05%~5%范围内;所述碱性pH缓冲液选自下列一种:三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液、硼酸-硼砂缓冲液、磷酸缓冲盐溶液;
(4)将ω-马来酰亚胺烷基酸和碳二亚胺缩合剂溶解于pH值在5.0~7.0范围内的酸性pH缓冲液中,其中ω-马来酰亚胺烷基酸的质量分数控制在0.01%~10%范围内,碳二亚胺缩合剂的质量用量为ω-马来酰亚胺烷基酸质量用量的50%~600%,活化1min~6h,制得活化中间体溶液;所述酸性pH缓冲液选自下列一种:磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、乙酸-乙酸钠缓冲液、2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液;
所述ω-马来酰亚胺烷基酸选自式(IV)所示化合物中的一种:
式(IV)中,R12为C1~C10的烷基;
所述碳二亚胺缩合剂选自N,N’-二环己基碳二亚胺、N,N’-二异丙基碳二亚胺和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐中的一种;
(5)将步骤(4)制得的活化中间体溶液加至步骤(3)制得的氨基修饰的AIE聚合物纳米粒子的乳液中,使ω-马来酰亚胺烷基酸的质量用量为氨基功能单体质量用量的10%~
1000%,用pH调节剂将乳液的pH值调节至7.0~9.0之间,室温反应1h~72h,制得马来酰亚胺修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液,透析得到纯化的马来酰亚胺修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液;所述pH调节剂选自下列至少一种:柠檬酸钠、硼砂、氢氧化钠、碳酸盐及其水合物、碳酸氢盐、碳酸盐、氨水;
(6)将末端含半胱氨酸序列单元的多肽溶解于去离子水中,配制多肽水溶液,其中多肽的质量分数控制在0.01%~10%范围内,将多肽水溶液加至步骤(5)制得的马来酰亚胺修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液中,使多肽的质量用量为氨基功能单体质量用量的5%~
100%,室温反应1h~72h,制得氨基和多肽修饰的AIE聚合物纳米粒子,透析得到纯化的氨基和多肽修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液;
所述末端含半胱氨酸序列单元的多肽选自表1中的至少一种;
表1.末端含半胱氨酸序列单元的多肽
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述的氨基功能单体为甲基丙烯酸2-氨基乙基酯盐酸盐或N-(3-氨丙基)甲基丙烯酰胺盐酸盐,氨基功能单体的用量为单体总质量用量的0.5%~15%。
3.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述阴离子乳化剂,选自下列至少一种:烷基磺酸盐乳化剂R13-SO3M、烷基硫酸盐乳化剂R14-OSO3M和烷基苯磺酸盐乳化剂R15-C6H4-SO3M,其中R13和R14为C10~C20的脂肪链,R15为C10~C18的脂肪链,M为Na+或K+;
所述阳离子乳化剂,选自下列至少一种:烷基三甲基卤化铵乳化剂R16N+(CH3)3X–,其中R16为C12~C20的脂肪链,X为Cl或Br;
所述两性乳化剂,选自下列至少一种:十二烷基氨基丙酸、十八烷基二羟乙基氧化胺、羧酸基甜菜碱R17N+(CH3)2CH2COO–、磺酸基甜菜碱R18N+(CH3)2CH2CH2SO3–或R19N+(CH3)
2CH2CH2CH2SO3–,其中R17、R18和R19为C12~C18的脂肪链;
所述非离子型乳化剂,选自下列至少一种:OP-系列乳化剂、O系列乳化剂、MOA系列乳化剂、吐温系列乳化剂和SG系列乳化剂。
4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于:所述OP-系列乳化剂是OP-9、OP-10和OP-
15中的至少一种;所述O系列乳化剂是O-10、O-20、O-30和O-50中的至少一种;所述MOA系列乳化剂是MOA-7、MOA-9、MOA-15和MOA-23中的至少一种;所述吐温系列乳化剂是吐温-20、吐温-40、吐温-60、吐温-80和吐温-85中的至少一种;所述SG系列乳化剂是SG-40和/或SG-
100。
5.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述的AIE分子为发射波长大于500nm的AIE分子,AIE分子的质量用量为单体总质量用量的0.1%~15%。
6.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,超声功率为50W~600W,超声时间为5min~30min。
7.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(4)中,所述的酸性pH缓冲液的pH值在6.0~6.5范围内,活化反应时间为5min~3h,所述的ω-马来酰亚胺基烷基酸为6-马来酰亚胺基己酸或3-马来酰亚胺基丙酸。
8.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(5)中,用pH调节剂将乳液的pH值调节至7.0~8.5,室温反应1h~36h。
9.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(6)中,反应时间为3h~48h。
10.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于:所述的乳化剂选自O系列乳化剂、MOA系列乳化剂、吐温系列乳化剂中的至少一种;所述油溶性引发剂选自下列至少一种:偶氮二异丁腈、偶氮二异戊腈和偶氮二异庚腈;所述的ω-马来酰亚胺基烷基酸为6-马来酰亚胺基己酸或3-马来酰亚胺基丙酸;所述的酸性pH缓冲液的pH值在6.0~6.5范围内;步骤(5)中用pH调节剂将乳液的pH值调节至7.0~8.5之间。