1.一种羧基和多肽修饰的AIE聚合物纳米粒子的制备方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:(1)将乳化剂溶于去离子水中,得到乳化剂水溶液,其中乳化剂的质量用量为去离子水质量用量的0.1%~10%;
所述乳化剂选自下列至少一种:阴离子乳化剂、两性乳化剂和非离子乳化剂;
(2)将AIE分子、奥氏熟化效应抑制剂和油溶性引发剂溶于羧基功能单体和疏水单体的混合液中,得到油相溶液,其中AIE分子质量用量为单体总质量的0.1%~30%;奥氏熟化效应抑制剂的质量用量为单体总质量的1%~12%;油溶性引发剂的质量用量为单体总质量
0.05%~10%;羧基功能单体的质量用量为单体总质量用量的0.1%~20%;所述的单体总质量是指羧基功能单体和疏水单体的总质量;
所述羧基功能单体为式(I)所示的丙烯酸和甲基丙烯酸以及式(II)所示的亚甲基丁二酸单体中的至少一种;
式(I)中,R1为H或CH3
所述的AIE分子选自下列AIE-1至AIE-42分子中的至少一种:
AIE-7分子,其中R2=H,R3=N(C2H5)2
所述奥氏熟化效应抑制剂选自下列至少一种:C14~C22的脂肪烃、C14~C22的脂肪醇;
所述油溶性引发剂选自下列至少一种:偶氮二异丁腈、偶氮二异庚腈、偶氮二异戊腈、偶氮二异丁酸二甲酯、过氧化二苯甲酰、过氧化叔戊酸叔丁酯、过氧化二碳酸二异丙酯、过氧化二月桂酰;
所述的疏水单体选自下列至少一种:苯乙烯、式(III)所示的丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯;
式(III)中,R7为H或甲基;R8为C1~C5的烷基;
(3)将按步骤(1)所制的乳化剂水溶液加至步骤(2)所制的油相溶液中,使油相溶液中的单体总质量为水溶液中水质量用量的1%~50%,经搅拌预乳化,得到粗乳液;将装有粗乳液的容器置于冰水浴中,在25W~950W的功率下超声处理0.5min~60min,制得单体细乳液;通氮除氧,在40℃~90℃的温度下,在氮气保护下反应1h~48h,制得表面羧基修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液,透析得到纯化的羧基修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液;
(4)将碳二亚胺缩合剂溶解在pH值在5.0~7.0范围内的酸性pH缓冲液中,配成质量分数在0.005%~10%范围内的碳二亚胺缩合剂缓冲溶液,再将其加入步骤(3)制得的羧基修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液中,其中碳二亚胺缩合剂的质量用量为羧基功能单体用量的
50%~600%,活化1min~6h,制得活化的羧基修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液;所述酸性pH缓冲液选自下列一种:磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、乙酸-乙酸钠缓冲液、2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液;
所述碳二亚胺缩合剂选自N,N’-二环己基碳二亚胺、N,N’-二异丙基碳二亚胺和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐中的一种;
(5)将ω-氨基马来酰亚胺溶解于pH值在7.0~9.0之间的碱性pH缓冲液中,ω-氨基马来酰亚胺的质量分数控制在0.01%~10%范围内;所述碱性pH缓冲液选自下列一种:三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液、硼酸-硼砂缓冲液、磷酸缓冲盐溶液;所述ω-氨基马来酰亚胺选自式(IV)所示化合物中的一种:式(IV)中,R9为C1~C6的烷基;
(6)将步骤(5)配置的ω-氨基马来酰亚胺溶液加至步骤(4)制得的活化的羧基修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液中,使ω-氨基马来酰亚胺的质量用量为羧基功能单体质量用量的
10%~1000%,用pH调节剂将乳液的pH值调节至7.0~9.0之间,室温反应1h~72h,制得马来酰亚胺修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液,透析得到纯化的马来酰亚胺修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液;所述pH调节剂选自下列至少一种:柠檬酸钠、硼砂、氢氧化钠、碳酸盐及其水合物、碳酸氢盐、碳酸盐、氨水;
(7)将末端含半胱氨酸序列单元的多肽溶解于去离子水中,配制多肽水溶液,其中多肽的质量分数控制在0.01%~10%范围内;将多肽水溶液加至步骤(6)制得的马来酰亚胺修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液中,使多肽的质量用量为羧基功能单体质量用量的5%~
100%,室温反应1h~72h,制得羧基和多肽修饰的AIE聚合物纳米粒子,透析得到纯化的羧基和多肽修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液;
所述末端含半胱氨酸序列单元的多肽,选自表1中的至少一种;
表1.末端含半胱氨酸序列单元的多肽
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述阴离子乳化剂,选自下列至少一种:烷基磺酸盐乳化剂R10-SO3M、烷基硫酸盐乳化剂R11-OSO3M和烷基苯磺酸盐乳化剂R12-C6H4-SO3M,其中R10和R11为C10~C20的脂肪链,R12为C10~C18的脂肪链,M为Na+或K+;
所述两性乳化剂,选自下列至少一种:十二烷基氨基丙酸、十八烷基二羟乙基氧化胺、羧酸基甜菜碱R13N+(CH3)2CH2COO–、磺酸基甜菜碱R14N+(CH3)2CH2CH2SO3–或R15N+(CH3)
2CH2CH2CH2SO3–,其中R13、R14和R15为C12~C18的脂肪链;
所述非离子型乳化剂,可选自下列至少一种:OP-系列乳化剂、O系列乳化剂、MOA系列乳化剂、吐温系列乳化剂和SG系列乳化剂。
3.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述的AIE分子为发射波长大于500nm的AIE分子,AIE分子的质量用量为单体总质量用量的0.1%~10%。
4.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述羧基功能单体的用量为单体质量用量的0.5%~15%。
5.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,超声功率为50W~600W,超声时间为5min~30min。
6.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(4)中,所述的酸性pH缓冲液的pH值在6.0~6.5范围内,活化反应时间为5min~3h。
7.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(5)中,所述ω-氨基马来酰亚胺为N-(2-氨基乙基)马来酰亚胺。
8.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(6)中,用pH调节剂将乳液的pH值调节至7.0~8.5之间,室温反应1h~36h。
9.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(7)中,反应时间为3h~48h。
10.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于:所述的乳化剂为阴离子乳化剂、非离子型乳化剂或阴离子乳化剂和非离子乳化剂组成的复合乳化剂,所述的非离子型乳化剂选自O系列乳化剂、MOA系列乳化剂、吐温系列乳化剂中的至少一种,所述的阴离子型乳化剂为十二烷基硫酸钠或十二烷基苯磺酸钠;所述奥氏熟化效应抑制剂为C16~C22烷烃;所述油溶性引发剂选自下列至少一种:偶氮二异丁腈、偶氮二异戊腈和偶氮二异庚腈;所述的ω-氨基马来酰亚胺为N-(2-氨基乙基)马来酰亚胺;所述的酸性pH缓冲液的pH值在6.0~6.5范围内;步骤(6)中,用pH调节剂将乳液的pH值调节至7.0~8.5之间。