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专利号: 2019104009826
申请人: 浙江理工大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-19
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种氨基和多肽修饰的AIE聚合物纳米粒子的制备方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:

(1)将乳化剂和氨基功能单体溶于去离子水中,得到水相溶液,其中乳化剂的质量用量为水质量用量的0.1%~10%;

所述乳化剂,选自下列至少一种:阴离子乳化剂、阳离子乳化剂、两性乳化剂和非离子乳化剂;

所述氨基功能单体为式(I)所示的氨基丙烯酸酯盐酸盐和氨基甲基丙烯酸酯盐酸盐以及式(II)所示的N‑(氨烷基)丙烯酰胺盐酸盐和N‑(氨烷基)甲基丙烯酰胺盐酸盐中的至少一种;

式(I)和式(II)中,R1、R3为H或甲基;R2、R4为C1~C5的烷基;

(2)将AIE分子和奥氏熟化效应抑制剂溶于疏水单体中,得到油相溶液;以步骤(1)使用的氨基功能单体和疏水单体的总质量为单体总质量,其中氨基功能单体的质量用量为单体总质量用量的0.1%~20%,AIE分子质量用量为单体总质量的0.1%~30%,奥氏熟化效应抑制剂的质量用量为单体总质量的1%~12%;所述单体总质量为步骤(1)中去离子水质量用量的1%~50%;

所述的AIE分子选自下列AIE‑1至AIE‑42分子中的至少一种:AIE‑7分子,其中R5=H,R6=N(C2H5)2

其中R7=OC6H13,R8=OC12H25,R9=H

所述奥氏熟化效应抑制剂选自下列至少一种:C14~C22的脂肪烃、C14~C22的脂肪醇;

所述的疏水单体选自下列至少一种:苯乙烯、式(III)所示的丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯;

式(III)中,R10为H或甲基;R11为C1~C5的烷基;

(3)将按步骤(1)所制的水相溶液加至步骤(2)所制的油相溶液中,经搅拌预乳化,得到粗乳液;将装有粗乳液的容器置于冰水浴中,在25W~950W的功率下超声处理0.5min~

60min,制得单体细乳液;通氮除氧,添加水溶性引发剂,所述水溶性引发剂的质量用量为单体总质量0.05%~10%,在25℃~90℃的温度下,在氮气保护下反应1h~48h,制得表面氨基修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液;透析得到纯化的氨基修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液;

用碱性pH缓冲液将氨基修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液的pH值调节至7.0~8.0之间,并将乳液的固含量控制在0.05%~5%范围内;

所述的水溶性引发剂选自下列至少一种:过硫酸盐类、水溶性偶氮类、氧化剂与还原剂构成氧化还原体系;并且乳化剂和水溶性引发剂的电性需匹配,所谓的“匹配”是指两者的电性不能相反;

所述碱性pH缓冲液选自下列一种:三羟甲基氨基甲烷‑盐酸缓冲液、硼酸‑硼砂缓冲液、磷酸缓冲盐溶液;

(4)将ω‑马来酰亚胺烷基酸和碳二亚胺缩合剂溶解于pH值在6.0~6.5范围内的酸性pH缓冲液中,ω‑马来酰亚胺烷基酸的质量分数控制在0.01%~10%范围内,碳二亚胺缩合剂的质量用量为ω‑马来酰亚胺烷基酸质量用量的50%~600%,活化1min~6h,制得活化中间体溶液;所述酸性pH缓冲液选自下列一种:磷酸氢二钠‑柠檬酸缓冲液、柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲液、乙酸‑乙酸钠缓冲液、2‑(N‑吗啡啉)乙磺酸缓冲液、磷酸二氢钾‑氢氧化钠缓冲液;

所述ω‑马来酰亚胺烷基酸选自式(IV)所示化合物中的一种:式(IV)中R12为C1~C10的烷基;

所述碳二亚胺缩合剂选自N,N'‑二环己基碳二亚胺、N,N'‑二异丙基碳二亚胺和1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐中的一种;

(5)将步骤(4)制得的活化中间体溶液加至步骤(3)制得的氨基修饰的AIE聚合物纳米粒子的乳液中,使ω‑马来酰亚胺烷基酸的质量用量为氨基功能单体质量用量的10%~

1000%,用pH调节剂将乳液的pH值调节至7.5~8.5之间,室温反应1h~72h,制得马来酰亚胺修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液;透析得到纯化的马来酰亚胺修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液;所述pH调节剂选自下列至少一种:柠檬酸钠、硼砂、氢氧化钠、碳酸盐及其水合物、碳酸氢盐、氨水;

(6)将末端含半胱氨酸序列单元的多肽溶解于去离子水中,配制多肽水溶液,其中多肽的质量分数控制在0.01%~10%范围内,然后将多肽水溶液加至步骤(5)制得的马来酰亚胺修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液中,使多肽的质量用量为氨基功能单体质量用量的5%~

100%,室温反应1h~72h,制得氨基和多肽修饰的AIE聚合物纳米粒子;透析得到纯化的氨基和多肽修饰的AIE聚合物纳米粒子乳液;

所述末端含半胱氨酸序列单元的多肽选自下列至少一种:序列为YGRKKRRQRRRC的HIV‑

1Tat(47‑57)肽、序列为RGDC的RGD肽、序列为NGRC的NGR肽、序列为REDVC的REDV肽、序列为HAIYPRHC的T7肽、序列为RKRLQVQLSIRTC的AG73肽。

2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述的氨基功能单体为甲基丙烯酸2‑氨基乙基酯盐酸盐或N‑(3‑氨丙基)甲基丙烯酰胺盐酸盐,氨基功能单体的用量为单体总质量用量的0.5%~15%。

3.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述阴离子乳化剂选自下列至少一种:烷基磺酸盐乳化剂R13‑SO3M、烷基硫酸盐乳化剂R14‑OSO3M和烷基苯磺酸盐乳+

化剂R15‑C6H4‑SO3M,其中R13和R14为C10~C20的脂肪链,R15为C10~C18的脂肪链,M为Na或K+

+ –

所述阳离子乳化剂,选自下列至少一种:烷基三甲基卤化铵乳化剂R16N (CH3)3X ,其中R16为C12~C20的脂肪链,X为Cl或Br;

所述两性乳化剂,选自下列至少一种:十二烷基氨基丙酸、十八烷基二羟乙基氧化胺、+ – + – +

羧酸基甜菜碱R17N (CH3)2CH2COO 、磺酸基甜菜碱R18N (CH3)2CH2CH2SO3 或R19N (CH3)–

2CH2CH2CH2SO3,其中R17、R18和R19为C12~C18的脂肪链;

所述非离子型乳化剂,可选自下列至少一种:OP‑系列乳化剂、O系列乳化剂、MOA系列乳化剂、吐温系列乳化剂和SG系列乳化剂。

4.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述的AIE分子为发射波长大于500nm的AIE分子,AIE分子的质量用量为单体总质量用量的0.1%~15%。

5.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,所述过硫酸盐类引发剂选自下列至少一种:过硫酸钠、过硫酸钾、过硫酸铵;所述水溶性偶氮类引发剂选自下列至少一种:偶氮二异丁脒盐酸盐、偶氮二异丁咪唑啉盐酸盐、偶氮二氰基戊酸、偶氮二异丙基咪唑啉;所述氧化还原体系中,所述还原剂为亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠或亚硫酸钠,所述氧化剂为过硫酸盐或过氧化氢。

6.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,超声功率为50W~600W,超声时间为5min~30min。

7.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(4)中,所述ω‑马来酰亚胺基烷基酸为6‑马来酰亚胺基己酸或3‑马来酰亚胺基丙酸,所述酸性pH缓冲液的pH值在6.0~6.5范围内,活化反应时间为5min~3h。

8.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(5)中,用pH调节剂将乳液的pH值调节至7.5~8.5,室温反应1h~36h。

9.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(6)中,反应时间为3h~48h。

10.如权利要求4所述的制备方法,其特征在于:所述的乳化剂选自O系列乳化剂、MOA系列乳化剂、吐温系列乳化剂中的至少一种;所述的奥氏熟化效应抑制剂为C16~C22烷烃;所述的水溶性引发剂为偶氮二异丁脒盐酸盐;所述的ω‑马来酰亚胺基烷基酸为6‑马来酰亚胺基己酸或3‑马来酰亚胺基丙酸;所述酸性pH缓冲液的pH值在6.0~6.5范围内;步骤(5)中用pH调节剂将乳液的pH值调节至7.5~8.5之间。