1.一种同时检测Exo I和TdT的电化学生物传感器的制备方法及其应用，其特征在于，具体机理如下：巯基DNA与金电极表面自发形成Au-S共价键而被固定于金电极表面。随后，TdT催化巯基DNA的3’-OH末端与三磷酸脱氧胞嘧啶核苷酸(dCTP)聚合，生成的富C DNA长链可用来形成AgNCs，通过Ag的溶出伏安信号来检测TdT活性。若TdT聚合作用前，引入Exo I，可以水解巯基DNA，从而最终影响AgNCs的形成，基于此可以检测Exo I活性。改变Exo I或TdT浓度会影响电化学信号的大小。

2.一种同时检测Exo I和TdT的电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：(1)传感器的制备

Electrode 1的制备：

首先将金电极(直径为2mm)在麂皮上用三氧化二铝粉末抛光5～10min，抛光后将电极置于超声清洗器中用二次蒸馏水中超声清洗5～10min，然后用N2吹干，标记为Electrode 

1。

Electrode 2的制备：

取巯基DNA溶液(2.5～15.0μL，5～10μM)，滴涂于Electrode 1表面，在4℃冰箱孵育过夜，蒸馏水缓缓冲洗电极，采用1.0～2.0mM巯基己醇(MCH)处理30～50min，置换电极表面非Au-S键固定的巯基DNA，蒸馏水缓缓冲洗电极，标记为Electrode 2。

Electrode 3的制备：

于Electrode 2电极表面，滴加2～10μL TdT反应液(组成为：1～5μL 5×TdT缓冲液，dCTP(1～3μL，5～10mM)，TdT(0.1～3μL，0.01～100U/mL)，加H2O至总体积为2～10μL)，在32～40℃下放置1～3h，蒸馏水缓缓冲洗电极，标记为Electrode 3。

Electrode 4的制备：

向Electrode 3电极表面滴加Ag+(2.5～5.0μL，1～2μM)，室温孵育15～20min，蒸馏水缓缓冲洗电极。再向电极表面滴加硼氢化钠溶液(NaBH4，2.5～5.0μL，1～2μM)，室温下避光反应15～20min，蒸馏水缓缓冲洗电极，标记为Electrode 4。

(2)一种同时检测Exo I和TdT的电化学生物传感器的应用

在Electrode 3制备过程中，使用TdT延长前，引入Exo I溶液(终浓度为0～1000U/mL)，

37℃下孵育30～60min，用于传感器制备，然后如(1)步骤，制备一系列传感器，用来检测不同浓度Exo I的电化学响应。

在Electrode 3制备过程中，改变TdT浓度(终浓度为0.01～10U/mL)，用于传感器制备，然后如(1)步骤，制备一系列传感器，用来检测不同浓度TdT的电化学响应。

3.根据权利要求1所述机理及权利要求2所述传感器制备，其特征在于：用来检测Exo I和TdT的电化学方法为方波伏安法，电位范围为0～0.3V，振幅为25mV。

4.根据权利要求1-3中所述制得的电化学生物传感器，可以实现不同浓度Exo I和TdT的检测及其小分子抑制剂的筛选，Exo I检测限为0.05U/mL，抑制剂的IC50为0.60mM；TdT检测限低至0.0003U/mL，抑制剂的IC50为1.26mM。