利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2019100966931
申请人: 宁波大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.基于i‑motif构型变化的末端转移酶电化学生物传感器的制备方法,其特征在于,具体步骤如下:

a.Electrode 1的制备

将2.5~7.5μL浓度为0.1~1μM的巯基DNA探针溶液滴加到干净且活化好的裸金电极Au表面,4℃冰箱放置8~16h,再用0.1~1.0mM巯基乙醇MCH处理20~60min,通过MCH与Au表面的Au‑S共价结合而置换电极表面非Au‑S键固定的捕获探针,蒸馏水缓缓冲洗电极,标记为Electrode 1;

其中,巯基DNA探针序列为:SH‑TGT AGT AGC;

b.Electrode 2的制备

配制总体积为5~15μL的TdT反应液,其中含有2~6μL蒸馏水,0.5~1.5μL 5×TdT缓冲液,0.5~1.5μL浓度为5~15mM的dCTP和0.5~1.5μL浓度为5~15U/mL的TdT,均匀混合后,滴于Electrode 1表面,在27~42℃下放置0.5~1.5h,蒸馏水缓缓冲洗电极,标记为Electrode 2;

c.Electrode 3的制备

将2.5~7.5μL浓度为0.5~1.5μM AgNO3溶液滴加到Electrode 2表面,室温孵育15~

30min,蒸馏水缓缓冲洗电极,标记为Electrode 3;

d.Electrode 4传感器的制备将2.5~7.5μL浓度为0.5~1.5mM GV溶液滴加到Electrode 3表面,室温反应15~

30min,蒸馏水缓缓冲洗电极,标记为Electrode 4,之后置于磷酸缓冲溶液PBS,0.1M,pH 

7.0中检测电化学响应;

其中所述磷酸缓冲溶液PBS浓度为0.1M,pH=7.0。

2.根据权利要求1所述的制备方法制备获得的一种基于i‑motif构型变化的末端转移酶电化学生物传感器。