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专利号: 2018113458834
申请人: 淮阴工学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机高分子化合物;其制备或化学加工;以其为基料的组合物
更新日期:2024-10-29
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种梨果肉硒多糖的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)前处理:选取果实大小均匀的砀山酥梨为试验材料,先用自来水洗净,再用蒸馏水反复冲洗,去除果皮和果核,留取果肉切碎烘干并用粉碎机打磨成干粉备用;

2)水提取:称取干粉样品5.0g于三口瓶中,加入40ml纯水于三口瓶中进入回流装置,达到100℃恒温浸提1h,加入离心管在离心机4000r/min离心,离心15min后拿出取上清液和残渣1,在残渣1中加入40ml纯水,再次沸水浴回流浸提2次得到上清液和残渣2,合并3次所取得的上清液,即是水溶性硒多糖提取液1,同时,称取等量的步骤1)处理后的干粉重复前述的水提取步骤得到水溶性硒多糖提取液2和残渣3;

3)酸溶性硒多糖的提取:在提取水溶性硒多糖后的残渣2中加入40ml的0.1mol/L HCl溶液,在60℃,功率32W的超声波中浸提1h后取加入离心管在离心机4000r/min离心,离心

15min后拿出取上清液和残渣4,再在离心后的残渣4中加入10ml0.1mol/L HCl再次在超声波中重复浸提2次得到上清液和残渣5,合并3次所得上清液,即可得酸溶性硒多糖提取液;

4)碱溶性多糖的提取:在提取水溶性硒多糖后的残渣3中加入40ml0.1mol/L的NaOH溶液,在60℃,功率32W的超声波中浸提1h后取加入离心管在离心机4000r/min离心,离心

15min后得到上清液和残渣6,再在离心后的残渣6中加入40ml0.1mol/LNaOH再次在超声波中重复浸提2次,合并3次所得上清液,即可得碱溶性硒多糖提取液;

5)分别将所提取到的水溶性硒多糖提取液1、水溶性硒多糖提取液2、酸溶性硒多糖提取液和碱溶性硒多糖提取液通过旋转蒸发仪蒸馏浓缩至4ml,不足的均用相对应的溶剂定容;

浓缩液微波消解后采用ICP‑MS测定样品中的硒含量;具体测定步骤如下:4ml浓缩液中取2ml样品加入消煮管,依次在消煮管中加入硝酸5mL并在记录本上标记好,将消煮液加入对应的50mL容量瓶中,为防止倒出,先在容量瓶上加一个玻璃漏斗,并用去离子水冲洗消煮管3遍,最后统一定容,用0.45μm水系滤膜,5mL注射器,过滤,滤液备用将定容好的溶液,取大约10mL,转移至10mL离心管中,待测,采用ICP‑MS测定样品中的硒含量,以硒标准液浓度(ppb)为横坐标,进样强度为纵坐标,得标准曲线方程y=58.471x-29.006,R2=1.000,x:‑1

硒标准液浓度(ppb),y:进样强度,Se含量(μg·100g )=(100CSe·V)/W其中,CSe:样品消‑1

化定容后溶液Se的浓度,μg·L ;V:样品消化后定容体积,L;W:样品的取样量,g;仪器经过进样强度值计算得到硒浓度,再依据硒含量公式依次测得硒多糖提取液中硒的含量,在测‑1

定的硒多糖组分中,硒多糖中硒的含量为0.356mg·kg ,水溶性硒多糖硒的含量最多为‑1 ‑1

0.128mg·kg 占硒多糖的36%,酸溶性硒多糖硒的含量最多为0.85mg·kg 占硒多糖的‑1

24%,碱溶性硒多糖硒的含量最多为0.99mg·kg 占硒多糖的28%。